既存薬による転写を標的とした萎縮性側索硬化症の新規治療法開発

使用现有药物靶向转录开发治疗萎缩性侧索硬化症的新疗法

• 批准号: 24790880
• 负责人: 村上 学
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2013-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24790880/
• 关键词: 筋萎縮性側索硬化症

本研究で我々の確立したスクリーニング・システムは、SOD1の転写を抑制するFDAで承認されている既存薬Xを同定した。既存薬XのSOD1転写抑制効果は、in vitroで、定量的リアル・タイムRT-PCR及びウェスタン・ブロッティングでmRNA、蛋白レベルともに効果を判定した。さらに、他のrhoキナーゼ(ROCK)阻害薬であるY-27632でも同様にSOD1の発現を抑制することを見出した。ROCKはROCK1とROCK2の2種類あり、RNA干渉によりその発現をひとつずつ抑制しても、SOD1の発現を抑制する作用はなかった。しかし、ROCK1とROCK2を同時にノックダウンすることにより初めてSOD1転写抑制作用を有することを見出した。以上の結果から、ROCK1及び2の活性を抑制することがSOD1の転写を制御することにつながり、かつ既存薬XがROCKの抑制効果を介してSOD1の転写を抑制していることを示唆するものである。既存薬Xは国内で既に臨床で使用されており、その安全性は広く受け入れられている。我々の研究は既存薬Xの新たな薬理学的性質を提示するとともに、ALS治療薬として新たに再配置できる可能性を示すものである。NFκBレポーターアッセイを用いてさらに解析すると、既存薬XがROCK抑制効果を介してNFκBの活性を低下させていることが示された。NFκBは神経炎症に関わる主要な転写因子で、ALS患者の脊髄前角においてその発現が亢進することが報告されている。 さらにNFκBの転写調節領域が、SOD1の5’非翻訳領域にあるプロモータ領域に存在しており、NFκBが実際にSOD1の転写調節因子の一つであるという報告もある。既存薬XのSOD1発現調節作用メカニズムの少なくとも一部は、NFκBを介している可能性が示唆された。

This study established that the presence of SOD1 in the system was inhibited and FDA recognized the existence of the same protein. Pre-existing SOD1 gene expression inhibition effects were determined in vitro, quantitative RT-PCR and mRNA, protein expression inhibition effects. This is the first time that the expression of SOD1 has been suppressed by Y-27632. ROCK inhibits the development of ROCK1 and ROCK2, RNA stem cells and SOD1. ROCK1 and ROCK2 are simultaneously inhibited by SOD1. As a result, ROCK1 and ROCK 2 activity inhibition is mediated by the inhibition of SOD1 activity. The existing drug X is used in clinical practice in China, and its safety is not affected. Our research suggests that the nature of existing ALS novel molecules may be involved in the realignment of ALS therapies. NFκB activity is reduced due to the presence of ROCK. NFκB is a major factor in neuroinflammation and is reported to be hyperactive in the anterior horn of the spine in ALS patients. NFκB is present in the 5 'non-inverted domain of SOD1, and NFκB is present in the 5' non-inverted domain of SOD1. The possibility of NFκB mediating the regulation of SOD1 expression in the presence of X is suggested.

项目成果

既存薬によるSOD1転写を標的とした筋萎縮性側索硬化症新規治療法の開発

使用现有药物靶向 SOD1 转录开发治疗肌萎缩侧索硬化症的新疗法

• 发表时间: 2012
• 作者: Saito T;Hasegawa Y;Ishigaki Y;Yamada T;Gao J;Imai J;Uno K;Kaneko K;Ogihara T;Shimosawa T;Asano T;Fujita T;Oka Y;Katagiri H.;玉川祐司;玉川祐司;玉川祐司;Tamagawa Y;Tamagawa Y;玉川祐司;Masaya Sakamoto;Hirofumi Suzuki;Hirofumi Suzuki;Hirofumi Suzuki;Yosuke Kayama;江口航生;Katsuno T;Yasuda K;Yasuda K;Abe H;村上 学
• 通讯作者: 村上 学