乳歯歯髄由来幹細胞の培養上清を応用した新規インプラントの開発

利用乳牙牙髓干细胞培养上清液开发新型种植体

• 批准号: 25861927
• 负责人: 原 憲史
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-25861927/
• 关键词: 口腔外科学; 再生医学; 歯科インプラント学

本研究では、乳歯歯髄由来幹細胞の培養上清（Conditioned medium: CM）を応用した新規歯科用インプラント開発を目的に、平成２５年度においてはCMの調整の最適化ならびに歯科用インプラントに用いられるチタン（Ti）表面へのCMに含有される可溶性成分の付着の解析を目的とした。方法としては、すでに当施設にて保存される乳歯歯髄幹細胞を培養し、その無血清培地よりCMを得て解析した。CM中の可溶性成分のTi表面への付着を確認するために、その成分にQdot標識を施し共焦点顕微鏡にて観察した。またTi表面へのCM成分の付着を確認するために、粉末状のTiを用いたクロマトグラフィーならびにマススペクトロメトリーをした。結果として、共焦点顕微鏡にてTi表面へのCM成分の付着が確認された。さらにタンパク質解析にて、Ti表面に付着したCMに含有されるタンパク質にはfibronectin、decorin、collagen type IVなどの細胞外マトリックスやinsulin-like growth factor-binding protein、bone morphogenetic protein receptor type-2などが含有されることが明らかとなった。これらの実績としては、乳歯歯髄幹細胞のCM中の可溶性成分にはTiに結合するタンパク質が含まれ、それらのタンパク質には細胞外マトリックスや成長因子の関連因子が含まれることが明らかとなった。これらの結果より、Ti表面にCM中の可溶性成分を付着させることで、歯槽骨にインプラントが埋入された際に、微小環境における周囲細胞のTi表面への接着を促進し、また細胞増殖や分化などにも影響を与える可能性があることが示唆された。さらにこれらの効果は早期のオッセオインテグレーションを可能にする新規インプラントの開発に貢献するものと考えられた。

This study aimed to optimize the regulation of Conditioned medium (CM) from stem cells in breast dentistry and analyze the soluble components in CM from the surface of Ti in 2005 to 2006. Methods: The culture of dental stem cells and the analysis of CM in serum-free culture were performed. The soluble component Ti in CM was identified by confocal microscopy. The CM component of Ti surface was confirmed to be in powder form. The results show that the CM component of Ti surface can be identified by confocal microscopy. In addition, the surface of Ti is coated with CM containing fibronectin, decorin, collagen type IV and extracellular protein, insulin-like growth factor-binding protein, bone morphogenetic protein receptor type-2. The soluble component of the CM of the mammary dental stem cells contains the extracellular component of the CM of the mammary dental stem cells. As a result, the soluble components in Ti surface CM are affected by the possibility of cell proliferation and differentiation. The results of the study are as follows: