课题基金 / 基金详情

メナキノン新規生合成経路酵素群の機能と構造に関する研究

メナキノン新規生合成経路酵素群の機能と構造に関する研究
新型甲基萘醌生物合成途径酶的功能和结构研究
批准号：
08F08429
负责人：
葛山 智久
金额：
$1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2008
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2008 至 2010
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08F08429/
关键词：
メナキノン生合成ポリプレニルジリン酸合成酵素結晶構造高度好熱菌ファルネシルチオジリン酸menaquinonebiosynthesisThermus thermophiluscrystallization

项目摘要

项目成果

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本研究課題では、高度好熱菌Thermus thermophilusと放線菌を用いて、生体にとって重要なメナキノンの新規生合成経路の全容を明らかにするとともに、その生合成酵素の結晶構造を基に触媒機構の解明を目指した。T.thermophilusのポリプレニルジリン酸合成酵素(TTC1291)については、平成21年度に引き続き、より高解像度のX線回折データを得るために、結晶化条件のスクリーニングを行った。また、平行して、該酵素の基質であるファルネシルジリン酸のアナログ分子、ファルネシルチオジリン酸を化学合成し、このアナログ分子との共結晶のスクリーニングを実施した。また、もう一つの基質であるイソペンテニルジリン酸との共結晶のスクリーニングも実施した。その結果、構造解析に適した大きさの結晶が得られたので、高エネルギー研究所のX-線回折装置を用いて解析データを収集するとともに、解析ソフトを用いて結晶構造解析を進めた。最終的に、イソペンテニルジリン酸との共結晶の構造を2.8オングストロームの解像度で解くことに成功した。一方で、基質アナログであるファルネシルチオジリン酸との共結晶を得ることはできなかった。次に、放線菌、Streptomyces sp CL190株のポリプレニルジリン酸合成酵素と推定されるNphNの機能解析を行った。その結果、大腸菌で発現させた組換え酵素NphNは、イソペンテニルジリン酸とジメチルアリルジリン酸からゲラニルジリン酸を合成する酵素であることが判明した。次に、本酵素の酵素学的パラメータを算出したところ、イソペンテニルジリン酸とジメチルアリルジリン酸に対するK_0値は、それぞれ、10.7μMと65.4μMであり、K_<cat>値は0.51s^<-1>であった。
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科研奖励(0)
会议论文
生物合成系の再設計による革新的核酸系化合物の創製
  • 批准号：
    21H02127
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
  • 资助金额：
    $11.32万
  • 财政年份：
    2021
  • 负责人：
    葛山 智久
  • 依托单位：
    The University of Tokyo
メロテルペノイド生合成マシナリーの機能と構造に関する研究
  • 批准号：
    17F17400
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $1.47万
  • 财政年份：
    2017
  • 负责人：
    葛山 智久
  • 依托单位：
    The University of Tokyo
テルペノイド－ポリケチド融合化合物生合成酵素の機能と構造に関する研究
  • 批准号：
    11F01399
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $0.9万
  • 财政年份：
    2011
  • 负责人：
    葛山 智久
  • 依托单位：
    The University of Tokyo
遺伝情報を利用した放線菌二次代謝産物の同定と生合成研究
  • 批准号：
    21380071
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
  • 资助金额：
    $9.15万
  • 财政年份：
    2009
  • 负责人：
    葛山 智久
  • 依托单位：
    The University of Tokyo
国内基金
海外基金
转录因子HL6调控植物卡生合成增强水稻抗病性的分子遗传基础研究
  • 批准号：
    32272071
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    54万元
  • 批准年份：
    2022
  • 负责人：
    余四斌
  • 依托单位：
    华中农业大学