原始卵胞内卵母細胞の活性化における細胞周期制御分子の関与

点击翻译按钮获取中文摘要

家畜の原始卵胞内の卵母細胞の発育開始を制御する機構に関してはほとんど知られていない。本研究では,ブタ原始卵胞内の卵母細胞の発育開始を制御する細胞周期制御分子の関与について調べた。これまでの研究から,仔ブタ(10-15日齢)の原始卵胞内の卵母細胞は,免疫不全マウスに移植後2ヶ月で発育完了の大きさに達するが,6ヶ月齢のブタの原始卵胞内の卵母細胞は発育を完了するまで移植後6ヶ月かかることを明らかにしている。6ヶ月齢のブタの原始卵胞内のほぼすべての卵母細胞には転写因子FOXO3の発現が認められるが,仔ブタではその発現は約50%である。また,6ヶ月齢のブタの原始卵胞内の卵母細胞のFOXO3をsiRNA干渉によってノックダウンした後マウスに移植すると,移植2ヶ月後には卵胞は胞状卵胞へと発達し,卵母細胞は発育した。この研究を進め,細胞周期制御因子Retinoblastoma protein (Rb)の原始卵胞内の卵母細胞における発現を免疫組織学的およびウエスタンブロットによって調べた。Rbは6ヶ月齢のブタの原始卵胞内のほぼすべての卵母細胞の核に発現していたが,仔ブタではFOXO3と同様に約半数の卵母細胞に発現しているに過ぎなかった。ブタRbのcDNAの部分塩基配列を決定し,それに基づいてsiRNAを作成した。Rbの発現は、Rbに対するslRNA処理によって低下したが,FOXO3に対するsiRNAによっても低下した。Rbをノックダウンした成体由来の原始卵胞を免疫不全マウスに異種移植したところ,移植2ヶ月後に原始卵胞は二次卵胞へと発達し,卵胞内の卵母細胞も発育した。これらの結果は,成体の原始卵胞内卵母細胞の発育の休止には,FOXO3に加えてRbが関与していることを示唆している。