シロイヌナズナにおけるRNAサイレンシングに関与する新規因子の探索

寻找参与拟南芥RNA沉默的新因子

• 批准号: 08J00110
• 负责人: 田上 優子
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08J00110/
• 关键词: マイクロRNA; RNAサイレンシング; シロイヌナズナ; 分子生物学; 植物

私はこれまでモデル植物シロイヌナズナを用いて、miRNA経路に関与する新規遺伝子を発見する目的で、miRNAの生成を促進するHYL1の機能欠損変異体の抑圧変異体を遺伝子学的な手法を用いて探索した。その結果、HYL1に結合してmiRNAの生成を担うDCL1における新規dcl1-13変異がその原因であることを見出した。この変異はDCL1のヘリカーゼドメインにおけるミスセンス変異(DCL1^<E395K>)であった。本年度は、このようなdcl1-13変異の影響について、その原因の分子メカニズムの解明を行った。まず細胞内局在を調べたところ、野生型DCL1は核質及び核内のドット状構造に局在するのに対し、DCL1^<E395K>は核質のみに局在しドット状の局在は見られなかった。さらに野生型DCL1では核小体へは局在しないのに対し、DCL1^<E395K>はその局在が観察された。次に、BiFC法によって細胞内におけるDCL1とHYL1との結合能を調べたところ、DCL1^<E395K>はHYL1との結合能が弱く、特に核内のドット状構造における結合が弱いことが示唆された。以上の結果からdcl1-13変異の影響を説明すると、HYL1存在下でmiRNA生成が減少する理由として、dcl1-13変異によって核内での局在が異常になることによりHYL1との結合が弱まったため、と考えられる。本研究はmiRNAの生成における最重要タンパク質を扱ったものであり、本解析は動物から植物まで広く保存された遺伝子発現調節機構であるmiRNA経路の理解を得る上で、重要な意義を持つものである。今後さらに、HYL1によるDCL1活性化メカニズム、及びDCL1のヘリカーゼドメインの役割についてより詳細な解明が期待される。

In order to improve the quality of the plant, the miRNA route and the new specification, see the purpose, the generation of the miRNA, the promotion of the HYL1 mechanism, the suppression of the body, and the exploration of the techniques used to study the disease. The result of the experiment and the combination of the HYL1 and the miRNA generated the cause of the new rule dcl1-13. This is the cause of the new rule dcl1-13. DCL1 (DCL1 ^ & lt;E395K>) is the first step in the world. In the current year, dcl1-13 will have an impact on the cause and cause of the disease. The intracellular and intranuclear nuclei of the wild-type DCL1 and the wild-type DCL1 ^ & DCL1 ^ & DCL1 are located in the cells of the wild type, the wild type, the wild type and the wild type. The wild-type DCL1 nucleosome bureau is inspecting the nucleosome in the wild-type DCL1 ^ & lt;E395K> environment. In the second, BiFC method, the combination of intracellular DCL1 HYL1 and DCL1 ^ & lt;E395K> HYL1 is weak, and the combination of weak and weak DNA in the nucleus shows that the combination of weak DNA and DCL1 shows that the combination of weak DNA and DCL1 shows that the combination of intracellular DNA and DCL1 is not effective. As a result of the above results, dcl1-13 shows that there is a significant difference in the number of reasons for miRNA generation in the presence of HYL1, and that dcl1-13 has a significant impact on the overall performance of the code. the results show that in the presence of dcl1-13, there are significant differences in the number of reasons, and in the presence of dcl1-13. In this study, miRNA is used to generate the most important information. In this study, the most important thing is to understand that the important meaning is important. This is the most important thing in this study. In this study, the most important thing in this study is that the most important thing in this study is to make sure that the plant is used to save the food, and that the important meaning is important. In the future, you will find that the DCL1 is active in the future, and that the DCL1 is active in the future, and that the DCL1 is in operation.

项目成果

小分子RNAの発現制御に関わる核内因子と細胞質因子

参与小RNA表达调节的核因子和胞质因子

• 发表时间: 2009
• 作者: 中村友美;他;淡野将太;淡野将太;淡野将太;Hiroaki Niikuni;Hiroaki Niikuni;Hiroaki Niikuni;Hiroaki Niikuni;Hiroaki Niikuni;牧本直也;仮屋圭史;中谷武志;Takeshi Nakatani;田上優子
• 通讯作者: 田上優子