Heterochromatin-induced gene silencing in Drosophila

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Die Heterochromatin-spezifische H3-K9-Methyltransferase (HMTase) SU(VAR)3-9 ist eine Schlüsselfunktion von Heterochromatin-induziertem Gensilencing. SU(VAR)3-9 bildet mit HP1 Proteinkomplexe. Die Bindung beider Proteine zum Heterochromatin ist voneinander abhängig. SU(VAR)3-9 zeigt auch zum Silencingfaktor SU(VAR)3-7 Wechselwirkungen. Ziel der Arbeiten ist die Aufklärung der Struktur von SU(VAR)3-9/HP1-Proteinkomplexen, der Kontrolle ihrer Assemblierung und die funktionelle Analyse der Bestandteile des Komplexes. Mit vorhandenen Su(var)3-9-Mutationen soll eine funktionelle Analyse der HMTase-Aktivität der SET-Domäne durchgeführt werden. Es sollen sowohl die in Hefedihybrid-Analysen isolierten putativen Interaktoren als auch die in genetischen Arbeiten identifizierten positiven und negativen Regulatoren molekulargenetisch und biochemisch untersucht werden. Die Arbeiten konzentrieren sich zunächst auf Su(var)3-1 und E(var)2-26B, die Schlüsselfunktionen des SU(VAR)3-9-abhängigen Silencings sind. Mit Hilfe von Chromatinimmunopräzipitationen (ChIp) soll die differentielle Bindung und Zusammensetzung von SU(VAR)3-9-Komplexen in verschiedenen heterochromatischen Regionen unter Einsatz neuer P-Transposon-Insertionen untersucht werden.