权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

フォトトロピンを介した核光定位運動の生理学的意義及び三次元ライブセルイメージング

向光素介导的核光定位和三维活细胞成像的生理意义

基本信息

批准号：
08J01712
负责人：
岩渕功誠
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

種子植物であるシロイヌナズナの葉の細胞核は青色光に依存した定位運動を示す(Iwabuchi et al., 2007).しかし,この運動の仕組みは未解明である.本年度は,核光定運動の仕組みについて研究を行った.細胞骨格阻害剤を用いた実験から,核光定運動はアクチン細胞骨格に依存することが明らかになった.間接蛍光抗体法によりアクチンを可視化したところ,細胞の長軸方向に沿って配向した太いアクチン繊維と核とがインタラクトしており,このアクチン繊維の構築が青色光照射前後で変わることがわかった.核光定位運動は青色光受容体フォトトロピン2により制御され,この受容体が欠損した変異体では青色光に依存したアクチン繊維の構築変化が見られないことから,核光定位運動はフォトトロピン2に依存したアクチン繊維の構築変化を介して起こると考察した(Iwabuchi et al., 2010).これまでの研究においては,核とアクチンを可視化するために細胞を固定する必要があった.しかしながら,この手法では生きた細胞の中で核やアクチンがどのような挙動を示すのか明らかにすることができない.そこで,核の運動をリアルタイムで観察するための実験系の確立を試みた.核を緑色蛍光タンパク質GFPで可視化した形質転換体(Histone2B-GFP)とアクチン繊維を赤色蛍光タンパク質tdTomatoで可視化した形質転換体(tdTomato-ABD2)を入手し,これらを掛け合わせることにより,核とアクチン繊維を同時可視化したシロイヌナズナ形質転換体を作製した.この形質転換体においても核光定位運動が正常に誘導されることを確認した.この形質転換体を用いることにより,核光定位運動におけるアクチン繊維の役割が明らかになると期待している.

The nucleus of the leaves of seed plants depends on cyan light for positional movement (Iwabuchi et al., 2007).しかし,この运动の仕组みは未解明である. This year, we will conduct research on the development of nuclear power plants. The cellular structure is resistant to damage, and the nuclear light fixed movement is dependent on the cellular structure. indirect light antibody method to visualize the orientation of cells along the long axis direction of the nucleus before and after cyan light irradiation. The nuclear photone-positioning motion is dependent on the cyan photoreceptor and the cyan photoreceptor and the construction of the cyan photoreceptor.(Iwabuchi et al., 2010). This is the first time that we've seen this. In the middle of the cell, the nucleus is moved, and the nucleus is moved. In this way, the nuclear motion is detected and the system is established. The core green light and GFP can be visualized by Histone2B-GFP and red light and tdTomato can be visualized by Histone2B-GFP and tdTomato-ABD2. This is the first time I've ever seen a person who's been in a physical position. This kind of physical and qualitative change is used in the middle of the world, and the nuclear light positioning movement is expected to be in the middle of the world.