新規EGF受容体制御因子の機能解析―創薬標的分子としての検証

新型 EGF 受体调节剂的功能分析 - 作为药物发现目标分子的验证

• 批准号: 08J11554
• 负责人: 田代 京子
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: University of Shizuoka
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08J11554/
• 关键词: Ymer; 乳がん細胞; PTPN13; EGF受容体; エンドサイトーシス; Her2; アクチン; プロテオミクス

Ymerは、EGF刺激をしたA431細胞を用いたリン酸化プロテオミクス研究によって発見された新規タンパク質である。これまでの研究から、EGF刺激によって、チロシンリン酸化し、EGF受容体の内部移行を阻害する役割があることが示唆されていた。しかし、その詳細なメカニズムは明らかではなかった。EGF受容体シグナル伝達経路が、様々ながんの発生や進行と関わりがあることに注目し、本研究は、YmerがEGF受容体にはたらく詳細なメカニズムを明らかにするとともに、創薬標的、疾患マーカーとしての可能性を検討することを目的として行われた。Ymerは、Long formとShort formの2種類のスプライスバリアントが存在する。mRAA発現を調べたところ、他のガン由来細胞株とは異なり、乳がん細胞では5種類のうち、4種類において、Long formが発現していた。このため、Long formが乳がん細胞性質に影響を与えているのではないかと考えられた。これまでの研究では、Short formの機能解析が主に行われていたが、本研究ではLong formの機能に着目した。YmerのLong formとShort formの違いを調べるため、本研究では質量分析計を用いた、結合パートナーの探索を試みた。組換えYmer(Long form, Short form)を定常的に発現させたA431細胞の抽出液を、2段階で精製し、精製物をSDS-PAGEで展開し、染色による可視化を行い、質量分析計でタンパク質の同定を行った。その結果、Tyrosine-protein phosphatasenon-receptor type 13(PTPN13)がLong formの精製物に特異的に存在していることが明らかになった。このため、Ymer Long formはPTPN13と相互作用する可能性が出てきた。チロシンキナーゼとがんの関係については歴史的に研究が盛んであるが、チロシンホスファターゼとの関わりについては、まだ、明らかでないところも多い。PTPN13の発現と乳がんの予後の間に相関があるという研究報告もあるため、PTPN13がYmerのLong formとShort formの機能的な相違性や、Ymerの機能メカニズムを研究する上で、重要な分子なるかもしれないと考えられる。しかし、期間中に、研究成果を学術論文にまとめるまでには至らなかった。

Ymer は, EGF stimulation を し た A431 cells を using い た リ ン acidification プ ロ テ オ ミ ク ス research に よ っ て 発 see さ れ た new rules タ ン パ ク qualitative で あ る. こ れ ま で の research か ら, EGF stimulation に よ っ て, チ ロ シ ン リ ン acidification し の internal migration, EGF, let body を resistance against す る service cut が あ る こ と が in stopping さ れ て い た. The details are なメカニズム なメカニズム Ming ら で で な な った った. EGF is let body シ グ ナ ル 伝 が 経 road, others 々 な が ん の 発 や on と masato わ り が あ る こ と に attention し, this study は, Ymer が EGF is let body に は た ら く detailed な メ カ ニ ズ ム を Ming ら か に す る と と も に, gen 薬 mark, disease マ ー カ ー と し て の possibility を beg す 検 る こ と を purpose と し て line わ れ た. There are two types, Ymer, Long formと and Short form, スプラ スバリア スバリア トが in する. MRAA 発 now を adjustable べ た と こ ろ, he の ガ ン origin cell lines と は different な り, milk が ん cells で は 5 kinds の う ち, 4 species に お い て, Long form が 発 now し て い た. こ の た め, Long form が milk が ん cell properties に influence を and え て い る の で は な い か と exam え ら れ た. こ れ ま で の research で は, Short form analytical が の function main line に わ れ て い た が, this study で は Long form の function with mesh し に た. Ymer の Long form と Short form の violations い を adjustable べ る た め, this study で は quality analysis meter を with い た, combined パ ー ト ナ ー の try to explore を み た. Group in え Ymer (Long form and Short form) を constant of に 発 now さ せ た A431 cells の extract を, 2-stage で refined し, refined を sds-page で し and dyeing に よ る visual line を い, quality analysis meter で タ ン パ ク qualitative の with fixed line を っ た. そ の results, Tyrosine protein phosphatasenon - receptor type 13 (PTPN13) が Long form の refined content exist に specific に し て い る こ と が Ming ら か に な っ た. <s:1> ため, Ymer Long form た PTPN13と interaction する possibility が て た た た. チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ と が ん の masato is に つ い て は に history study が sheng ん で あ る が, チ ロ シ ン ホ ス フ ァ タ ー ゼ と の masato わ り に つ い て は, ま だ, Ming ら か で な い と こ ろ も い more. PTPN13 の 発 the と emulsion が ん の to に phase between の after masato が あ る と い う study も あ る た め, PTPN13 が Ymer の Long form と Short form の functionary な や, deemed Ymer の function メ カ ニ ズ ム を research す る で, important な molecular な る か も し れ な い と exam え ら れ る. <s:1> らな を, during the period に, research achievements を, academic papers にまとめるまでに にまとめるまでに to らな った った.

项目成果

EGF受容体下流のプロテオミクスより同定した新規タンパク質の解析とバイオマーカーへの応用の可能性

EGF受体下游蛋白质组学鉴定的新蛋白质分析及其应用于生物标志物的可能性

• 发表时间: 2009
• 作者: Tashiro K;Tsunematsu T;Okubo H;Ohta T;Sano E;Yamauchi E;Taniguchi H;Konishi H;田代京子;宇田川理;田代京子
• 通讯作者: 田代京子

Functional analysis of Ymer, a novel inhibitor of endocytosis of epidermal growth factor(EGF)receptor

新型表皮生长因子（EGF）受体内吞抑制剂Ymer的功能分析

• 发表时间: 2009
• 作者: Tashiro K;Tsunematsu T;Okubo H;Ohta T;Sano E;Yamauchi E;Taniguchi H;Konishi H;田代京子
• 通讯作者: 田代京子

上皮細胞成長因子(EGF)受容体下流におけるシグナル伝達分子のプロテオミクス解析により同定された新規タンパク質とそのバイオマーカーへの応用の可能性

通过对表皮生长因子（EGF）受体下游信号分子的蛋白质组学分析鉴定出一种新蛋白质及其作为生物标志物的潜在应用

• 发表时间: 2010
• 期刊: 薬学雑誌 130
• 作者: 田代京子;小西博昭;鍋師裕美;山内英美子;谷口寿章
• 通讯作者: 谷口寿章

GAREM, a Novel Adaptor Protein for Growth Factor Receptor-bound Protein 2, Contributes to Cellular Transformation through the Activation of Extracellular Signal-regulated Kinase Signaling

• DOI: 10.1074/jbc.m109.021139
• 发表时间: 2009-07-24
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Tashiro, Kyoko;Tsunematsu, Takumi;Konishi, Hiroaki
• 通讯作者: Konishi, Hiroaki