Development of observation technology with electron microscope of force-generating myosin

产力肌球蛋白电子显微镜观察技术的开发

• 批准号: 20570155
• 负责人: YASUNAGA Takuo
• 金额: $ 3.08万
• 依托单位: Kyushu Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20570155/
• 关键词: 運動・輸送; ミオシン; 筋肉; アクチン; 電子顕微鏡; 力発生; クライオ電子顕微鏡法; 急速凍結装置; トモグラフィー; 分子モーター; 画像処理

We tried to develop observation technology with electron microscopes of force generating myosin. One necessary technology is to observe the active interaction between a myosin filament and an actin filament during force generation. The actin filament could be, in success, pulled by a magnetic bead, which was linked to the actin covalently. The other is to observe three-dimensional structure of single myosin head and actin filament by electron cryo-microscopy. We developed new three-dimensional reconstruction programs for single particle analysis and electron tomography of frozen-hydrated specimens and obtained highly-resolved 3D map of actin filaments/actomyosin complexes and preliminary 3D maps of single head myosin bound to a single actin filament.

我们试图开发产生肌球蛋白的电子显微镜观察技术。一项必要的技术是观察肌球蛋白细丝和肌动蛋白细丝在力产生过程中的主动相互作用。成功的话，肌动蛋白细丝可以被磁珠拉动，磁珠与肌动蛋白共价连接。另一种是用电子冷冻显微镜观察单个肌球蛋白头部和肌动蛋白细丝的三维结构。我们开发了用于冷冻水化标本的单颗粒分析和电子断层扫描的新的三维重建程序，并获得了高分辨率的肌动蛋白细丝/肌球蛋白复合体的3D图和单头肌球蛋白与单个肌动蛋白细丝结合的初步3D图。

项目成果

アクチン-ミオシン硬直複合体の高分解能3次元像の獲得

获取肌动蛋白-肌球蛋白刚性复合物的高分辨率 3D 图像

• 发表时间: 2009
• 作者: 塚田祥弘;若林健之;安永卓生
• 通讯作者: 安永卓生

Obtainment of high resolution 3D map of actin-myosin rigor complex

获得肌动蛋白-肌球蛋白严格复合物的高分辨率 3D 图

• 发表时间: 2009
• 作者: 塚田祥弘;若林健之;安永卓生
• 通讯作者: 安永卓生

Protein polymorphism detection using subtomographic maps and structural classification

使用层析成像图和结构分类进行蛋白质多态性检测

• 发表时间: 2009
• 作者: Ohta K.;Yasunaga T.
• 通讯作者: Yasunaga T.

電子顕微鏡画像解析のためのGUI環境を有した新規分子可視化ツールの開発

开发具有 GUI 环境的新型分子可视化工具，用于电子显微镜图像分析

• 发表时间: 2010
• 作者: 山下理沙;瀧本雄介;中尾亮太;坂本寛;安永卓生
• 通讯作者: 安永卓生

数の傾斜面像からの3次元像構築によるタンパク質ポリモルフイズムの検出

通过从多个倾斜平面图像构建 3D 图像来检测蛋白质多态性

• 发表时间: 2010
• 作者: 太田興希;高崎寛子;安永卓生
• 通讯作者: 安永卓生