がん抑制遺伝子産物TSLC1による膜輸送制御とその細胞増殖抑制への意義の解析

抑癌基因产物TSLC1对膜转运的调控及其抑制细胞生长的意义分析

• 批准号: 20790072
• 负责人: 西谷 直之
• 金额: $ 2.41万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20790072/
• 关键词: 癌; シグナル伝達; 細胞・組織; 発生・分化; 薬学; 細胞増殖

カドヘリンによる細胞間接着の低下はβカテニンの核内機能を亢進し、細胞のがん化に寄与する。申請者は膜輸送制御因子ARF GTPase activating proteln(ARF-GAP)の一つであるGIT1ががん抑制遺伝子産物TSLC1と複合体を形成することを見出した。本研究では、「TSLC1がカドヘリンの膜輸送を制御することによって、βカテニンによるがん化シグナルを抑制する」という仮説の検証を目的とし以下の実験を行った。1.TSLC1とGIT1による細胞増殖シグナルの抑制TSLC1とGIT1の変異体、遺伝子ノックダウン、阻害剤を用いて各因子の機能を制限したところ、TSLC1とカドヘリンの細胞表面への局在や細胞間接看の安定化にはARF-GAP活性が必要なことが明らかとなった。また、TSLC1のノックダウンによって、βカテニン/TCFによる転写活性が亢進することがルシフェラーゼアッセイで確認された。さらに、細胞増殖への影響もMTTアッセイで評価した。高密度培養条件下では、TSLC1ノックダウンによって細胞増殖が亢進した。一方、低密度培養条件下では、逆に増殖が抑制される傾向にあった。細胞密度による増殖と生存の制御は今後の研究課題とする。2.TSLC1とGIT1のin vivo上皮系組織構築への関与上皮系組織構築へのTSLC1とGIT1の相互作用の重要性をゼブラフィッシュ胚の側線感覚器官形成を指標に評価した。TSLC1とGIT1の変異体や遺伝子ノックダウンを用いて各因子の機能を制限し上皮組織構築への影響を観察したところ、TSLC1とGIT1が協調して上皮組織構築を制御することが明らかとなった。

The intercellular connection between the cells is reduced, the nuclear function of the β-cell is increased, and the cell is transformed. The applicant has identified the membrane transport control factor ARF GTase activating proteln(ARF-GAP) as an inhibitor of the formation of TSLC1 complexes. This study aims to investigate the effects of TSLC1 on membrane transport inhibition and β-transport inhibition. 1. TSLC1 and GIT1 inhibit cell proliferation, and TSLC1 and GIT1 inhibit cell proliferation. TSLC1 and TSLC1 are recognized for their high activity. The effect of MTT on cell proliferation was evaluated. Under the condition of high density culture, TSLC1 cells proliferate rapidly. Under the condition of low density culture, the tendency of reverse propagation was inhibited. The control of cell density, proliferation and survival is a future research topic. 2. The relationship between TSLC1 and GIT1 in vivo and the importance of the interaction between TSLC1 and GIT1 in the development of embryonic stone-sensitive organs TSLC1 and GIT1 are different genes, and their functions are restricted by epithelial tissue architecture.

项目成果

ゼブラフィッシュ胚を用いたがん分子標的薬探索系の開発

利用斑马鱼胚胎开发癌症分子靶点药物发现系统

• 发表时间: 2009
• 作者: 西谷直之;津田香代子;上原至雅
• 通讯作者: 上原至雅

ARF-GAP結合性膜受容体の反発性ガイド機能と細胞間接着への関与

ARF-GAP结合膜受体的排斥引导功能及其参与细胞间粘附

• 发表时间: 2008
• 作者: 波多江典之;中村純;奥島鉄雄;山田容子;岩村樹憲;西谷直之
• 通讯作者: 西谷直之