骨吸収を促進するNodファミリーシグナルの析

促进骨吸收的Nod家族信号分析

• 批准号: 20592351
• 负责人: 上松 隆司
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Matsumoto Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20592351/
• 关键词: 骨吸収; Nod; シグナル伝達; MDP; LPS; 歯周病; 歯槽骨; 破骨細胞; リポ多糖; ペプチドグリカン; RANKL

歯周疾患において認められる歯槽骨吸収はリポ多糖体(LPS)などの菌体成分により誘導される。近年、各種の菌体成分を認識する受容体[Toll-like receptor(TLR)]が次々と発見され菌体成分の炎症惹起作用が明らかにされてきた。一方、ペプチドグリカンの構成分であるムラミジルペプチド(GlcNAc-MurNAc-L-Ala-D-isoGln)(MDP)DAP-containing desmuramylpeptide (ie-DAP)は、細胞内に存在するNod1やNod2に結合して作用を発現すると考えられている。MDPはLPSやポリペプチドが誘導するサイトカイン産生を増強し、MDPはLPSが誘導する破骨細胞形成を促進すると推測される。本年度はNodシグナルがどのようにしてLPSが誘導する破骨細胞形成を抑制するのか解明することを目的として、Nod2シグナルとTLRシグナルの相互作用ならびにLPSとMDPのCD14陽性細胞に対する作用について検討した。本研究ではヒト末梢血から得られたCD14陽性細胞にreceptor activator of nuclear factor-kB ligand (RANKL)とMacrophage-Colony Stimulating Factor (M-CSF)を添加して破骨細胞を誘導させる実験系を試みた。この実験系を用いてヒト破骨細胞におけるnucleotide-binding oligomerization domain containing 2 (Nod2)の発現を検討した。その結果、LPS処理したCD14陽性細胞ではNod2の発現がみられ、Muramyldipeptide (MDP)の添加によって発現が増加する傾向がみられた。これはLPSによるToll-like receptor (TLR)4とtumor necrosis factor(TNF)-αを介したNodの発現と考えられた。しかし、破骨細胞の成熟とともにTNF-αの発現は減少する傾向がみられた。この結果は、破骨細胞形成の初期と分化成熟時期では破骨細胞形成シグナルが複雑であることを示している。本実験系では細胞調製の段階でRANKLとM-CFSを添加培養しており、培養状態によってアポトーシスに陥る細胞が存在していた。さらにヒト由来単球培養細胞におけるNod2の発現は安定していなかった。ヒト末梢血由来CD14陽性細胞からの破骨細胞誘導条件をさらに検討する必要があると考えられた。

在牙周疾病中观察到的肺泡骨吸收是由细菌成分（例如脂多糖（LPS））诱导的。近年来，已经发现了识别各种类型的细菌细胞成分[TOLL样受体（TLR）]的受体，并且已经发现了细菌细胞成分的炎症作用。另一方面，认为是肽聚糖的一个组成部分的穆拉米二基肽（GlcNAc-Murnac-L-Ala-d-Isogln）（MDP）含DAP DAP的脱氨基酰基肽（IE-DAP），它是与NOD1和NOD2结合的，并与细胞中产生并产生效果。据推测，MDP可以增强LPS和多肽诱导的细胞因子产生，而MDP促进了LPS诱导的破骨细胞形成。今年，我们研究了NOD2信号与TLR信号之间的相互作用，以及LPS阳性细胞对CD14阳性细胞的影响，目的是阐明nod信号如何抑制LPS诱导的破骨细胞形成。在这项研究中，我们尝试了一个实验系统，其中将核因子-KB配体的受体激活剂（RANKL）和巨噬细胞 - 色刺激因子（M-CSF）添加到从人外围血液中获得的CD14阳性细胞中，以诱导骨细胞。该实验系统用于研究人类破骨细胞中包含2（NOD2）的核厄当结合寡聚结构域的表达。结果，在用LPS处理的CD14阳性细胞中观察到了NOD2表达，并且随着添加穆拉米二肽（MDP）的添加，表达倾向于增加。这被认为是通过Toll样受体（TLR）4和肿瘤坏死因子（TNF）-α通过LPS来表达的表达。但是，随着破骨细胞的成熟，TNF-α趋于降低。该结果表明，在破骨细胞形成的早期和分化成熟时，破骨细胞生成信号是复杂的。在这个实验系统中，在细胞制备阶段将RANKL和M-CF添加到培养物中，并且有一些细胞根据培养状态而导致细胞凋亡。此外，NOD2在人源性单核细胞培养细胞中的表达不稳定。人们认为，需要进一步研究来自人类外周血的CD14阳性细胞的破骨细胞诱导条件。

项目成果

Inorganic Polyphosphate Induces Osteoblastic Differentiation

无机聚磷酸盐诱导成骨细胞分化

• 发表时间: 2009
• 作者: 安部貴大;依田哲也;坂本一郎;今井英樹;須田里香;櫻井仁亨;田口茂和;今井謙一郎;小林明男;小村健;Sato T;安部貴大;嶋村由美子;堀直子;堀直子;堀直子;安部貴大;堀直子;嶋村由美子;小村豪;嶋村由美子;嶋村由美子;安部貴大;安部貴大;安部貴大;古株彰一郎;安部貴大;金築真理;安部貴大;安部貴大;小林明男;Ara T.;Takahashi M.;Takahashi M;Uchihashi T.
• 通讯作者: Uchihashi T.