インフルエンザウイルスのショウジョウバエへの感染

果蝇感染流感病毒

• 批准号: 20658080
• 负责人: 下島 昌幸
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20658080/
• 关键词: インフルエンザ; ショウジョウバエ; 低温馴化; インフルエンザウイルス; 宿主因子

低温馴化株をベースにした組換えインフルエンザウイルスの作製HA分節にVSV-G遺伝子、NA分節にVenus遺伝子を持ち、残り6分節を低温馴化ウイルス由来のものとしたインフルエンザウイルスの作製をリバースジェネティクス法で試みたが、増殖するウイルスは得られなかった。そこで、低温馴化ウイルス由来ではないWSN株由来の分節と様々な組み合わせを作り検討したところ、少なくともMおよびPB2分節はWSN株由来でないと33℃で増殖するウイルスが得られないことが判明した。残り4分節をすべて低温馴化ウイルス由来にすることはできなかったが、幾つかの分節が低温馴化株由来で33℃において増殖するウイルスが5種類(5つの組み合わせ)得られた。増殖可能な組換えウイルスの低温馴化得られた5種類のウイルスは33℃では増殖可能だが、この温度では接種対象としたいショウジョウバエは生存できない。そこで、まずこのウイルスの低温馴化(2℃ずつ、BHK細胞、MOI=0.0005で接種)を行った。31℃ではいずれも増殖可能であったが、29℃では増殖性が急激に低下し、5種類のうち2つは増殖不可能となった。残り3種類に対し更に2回29℃で増殖させたところ、増殖能の上昇が認められ約5x10^4～5x10^5PFU/mlのウイルス液が得られた。すべての分節がWSN株由来のものが最も高いウイルス価を示し、低温馴化は予想に反し比較的容易おこることが判明した。

Cold acclimation strains を ベ ー ス に し た group in え イ ン フ ル エ ン ザ ウ イ ル ス の cropping HA segmental に types - G heritage 伝, NA section に Venus heritage 伝 を hold ち, residual り section 6 points を cold acclimation ウ イ ル ス origin の も の と し た イ ン フ ル エ ン ザ ウ イ ル ス の cropping を リ バ ー ス ジ ェ ネ テ ィ ク ス method で try み た が, raised colonization す る ウ Youdaoplaceholder5 ス ス られな gets られな った った. そ こ で, cold acclimation ウ イ ル ス origin で は な い WSN plant origin の segmental と others 々 な group み close わ せ を as り beg し 検 た と こ ろ, less な く と も M お よ び PB2 segmental は WSN plant origin で な い と 33 ℃ で す rights colonization る ウ イ ル ス が have ら れ な い こ と が.at し た. Residual り 4 section を す べ て cold acclimation ウ イ ル ス origin に す る こ と は で き な か っ た が, several つ か の segmental が cold acclimation plant origin で 33 ℃ に お い て raised colonization す る ウ イ ル ス が 5 kinds (5 つ の group み close わ せ) have ら れ た. Rights may yield な group in え ウ イ ル ス の cold acclimation to ら れ た 5 kinds の ウ イ ル ス は 33 ℃ で は rights may yield だ が, こ の temperature で は vaccination as と seaborne し た い シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ は survival で き な い. そ こ で, ま ず こ の ウ イ ル ス の cold acclimation (2 ℃ ず つ, BHK cells, MOI = 0.0005 で vaccination) line を っ た. 31 ℃ で は い ず れ も rights may yield で あ っ た が, 29 ℃ で は sexual rights colonization が nasty shock に し, 5 kinds の う ち 2 つ は raised colonization impossible と な っ た. Residual り 3 kinds に し more に seaborne 2 back to 29 ℃ で raised colonization さ せ た と こ ろ, raised colonization can rise が の め ら れ about 5 x10 ^ 4 ~ 5 x10 ^ 5 pfu/ml の ウ イ ル ス liquid が must ら れ た. す べ て の segmental が WSN plant origin の も の が most high も い ウ イ ル ス 価 を し, cold acclimation は to want to に anti し compare easy お こ る こ と が.at し た.

项目成果

Mutational Analysis of Conserved Amino Acids in the Influenza A Virus Nucleoprotein

• DOI: 10.1128/jvi.02642-08
• 发表时间: 2009-05-01
• 期刊: JOURNAL OF VIROLOGY
• 影响因子: 5.4
• 作者: Li, Zejun;Watanabe, Tokiko;Kawaoka, Yoshihiro
• 通讯作者: Kawaoka, Yoshihiro

Human P-selectin glycoprotein ligand-1 is a functional receptor for enterovirus 71

• DOI: 10.1038/nm.1961
• 发表时间: 2009-07-01
• 期刊: NATURE MEDICINE
• 影响因子: 82.9
• 作者: Nishimura, Yorihiro;Shimojima, Masayuki;Shimizu, Hiroyuki
• 通讯作者: Shimizu, Hiroyuki

Growth determinants for H5NI influenza vaccine seed virusesin MDCK cells.

MDCK 细胞中 H5NI 流感疫苗种子病毒的生长决定因素。

• 发表时间: 2008
• 期刊: J. Viro1. 82
• 作者: Murakami;S.
• 通讯作者: S.

A型インフルエンザウイルスvRNPの安定発現細胞株を用いたvRNA転写・複製阻害物質の探索

使用稳定表达甲型流感病毒 vRNP 的细胞系寻找 vRNA 转录/复制抑制剂

• 发表时间: 2009
• 作者: 小澤;ら
• 通讯作者: ら

マールブルグウイルスの病原性とC型レクチン介在性細胞侵入効率の相関

马尔堡病毒致病性与C型凝集素介导的细胞进入效率的相关性

• 发表时间: 2008
• 作者: Takahiro Gondo;Jun Matsumoto;Shin-ishi Turuta;Midori Yoshida;Akira Kawakami;Fumihiro Terami;Masumi Ebina;Toshihiko Yamada;Ryo Akashi;松野啓太
• 通讯作者: 松野啓太