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耳小骨を用いた骨細管ネットワークの3次元的解析

利用听小骨对骨小管网络进行三维分析

基本信息

批准号：
20659063
负责人：
松尾光一
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

骨に埋まっている骨細胞(osteocyte)は、神経細胞のように樹状突起をもち、骨細胞同士や骨表面の骨芽細胞とネットワークを構成している。骨細管(canaliculi)は直径200nmほどの細管で内部に骨細胞の樹状突起を包んでいる。本研究ではマウスの摘出骨を実験材料にX線位相顕微鏡CT(SPring-8,兵庫)やマイクロCT、電子顕微鏡、銀染色などの手法を駆使し、骨細管の走行を立体的に解析することを目的とした。骨細管の描出には分解能と視野のトレードオフがあることが、平成20年度の研究で明らかになったので、耳小骨に加えて、脛骨をプラスチックに包埋したものを切り出したものも解析した。野生型のC57BL/6マウスのツチ骨をさまざまな週齢において摘出し、短突起の血管、骨小腔、骨細管ネットワークを比較解析した。ツチ骨はエタノール固定し、乾燥した状態で、CT撮影を行い、得られた画像から立体再構築を行った(南郷脩史,百生敦らとの共同研究)。さらに骨小腔や血管などの空洞を除いた純粋な骨基質部分(骨基質+骨細管)の部分に焦点をあて、その部分の骨密度(gray scale)の解析を合わせて行った。これらの解析から、骨内部における微小血管と骨細管の連結、さらに骨内部に存在する破骨細胞様の巨大細胞と血管・骨細管の連絡の可視化に成功した。現在、日本骨代謝学会と米国骨代謝学会(ASBMR)に抄録を投稿中である。

Bone marrow cells and nerve cells are composed of dendrites and osteocytes and bone bud cells on the bone surface. Bone canaliculi are 200nm in diameter and contain dendritic processes of bone cells inside canaliculi. The purpose of this study is to extract bone from bone by X-ray phase microscopy CT(SPring-8, Hyogo), electron microscopy, silver staining, and three-dimensional analysis of bone tubule movement. The bone tubule can be separated from the field of vision, and the bone tubule can be separated from the field of vision. The bone tubule can be separated from the field of vision. Comparative analysis of wild-type C57BL/6 cells The bone is fixed, dry, CT imaging, and three-dimensional reconstruction (joint study of Nankai and Baisheng). The analysis of bone mineral density (gray scale) in the bone matrix part (bone matrix + bone tubule) is carried out in combination with the analysis of bone cavity and blood vessel cavity in the bone matrix part (bone matrix + bone tubule). The analysis and visualization of microvascular and tubule connections in bone and osteoclast connections in bone were successful. The Japanese Society of Bone Metabolism and the American Society of Bone Metabolism (ASBMR) are now publishing their articles.