权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Conformation of protein bound to membrane characterized by time-resolved vacuum-ultraviolet circular dichroism spectroscopy

通过时间分辨真空紫外圆二色光谱表征与膜结合的蛋白质的构象

基本信息

批准号：
22K06163
负责人：
松尾光一
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

生体膜との相互作用による水溶性タンパク質のダイナミックな構造変化は，生体膜上で様々な生命機能や物性を誘発する。この構造変化と機能との関係を理解するには，タンパク質の天然と膜結合構造を理解するだけでなく、天然から膜結合構造に至る過程（速度・中間構造）を詳細に捉える必要がある。本研究では、膜結合性タンパク質の構造解析法として有効な手法である真空紫外円二色性分光法に、時間分解機能を持たせることで、生体膜相互作用によるタンパク質の構造変化（構造ダイナミクス）の観測を試みた。時間分解のために膜結合タンパク質溶液と生体膜溶液を高効率かつ高速で混合可能な特殊なマイクロ流路時間分解セルを開発し、相互作用中のタンパク質構造変化を観測した。膜結合タンパク質には、生体膜相互作用研究のモデルタンパク質であるbetaラクトグロブリン(bLG)を使用した。生体膜には、溶液中でミセルを形成するリゾリン脂質(LysoDMPG)と界面活性剤であるSodium Dodecyl Sulfate(SDS)を使用した。構築した時間分解装置により、LysoDMPG相互作用では1～60秒、SDS相互作用では0.1～90秒の時間分解CDスペクトルの獲得することができた。CD値の時間変化をグローバルフィッティングすることで2つの速度定数が算出され、各相互作用で1つの中間状態の存在と、生体膜の種類に依存した膜結合状態の形成速度が確認された。以上より構築した時間分解装置が生体膜相互作用過程の動的構造の研究に応用できることが分かった。

The biofilm interacts with each other, and the biological membrane is sensitive to the physical properties and physical properties of the biological membrane. The machine can be used to understand the quality of the machine, the natural film is combined with the machine to understand the machine, and the natural film is combined with the process (medium speed) to catch the necessary equipment. In this study, the analytical method of the combination of molecular weight and membrane was used to analyze the performance of vacuum ultraviolet dichroism spectroscopy (VUV dichroism), time decomposition mechanism and biological membrane interaction. in this study, the analytical method was used to analyze the performance of vacuum ultraviolet dichroism spectroscopy (VUV dichroism). The combination of time-decomposing-temperature-sensitive membrane combined with solid membrane solution-- high-rate, high-speed and high-speed mixing of aqueous membrane solutions may cause the decomposition of temperature and temperature in the time of the flow path of a special kind of gas, and the interaction between them may lead to the formation of chemical cycles. Study on the interaction between biofilm and biofilm in vivo. The interaction between membrane and biological membrane was studied in vivo. The interaction between beta and bLG was studied. The biofilm and the liquid in the solution form the lipid (LysoDMPG), the interface activity, the Sodium Dodecyl Sulfate (SDS), the use of lipids. The time decomposition of the time decomposer, the LysoDMPG interaction time, and the SDS interaction time are 0.1-90 seconds and 0.1-90 seconds, respectively. The time of the CD decomposition device is less than 90 seconds. The speed of each interaction is calculated, and there is a state of presence in each interaction, and the speed of the combination of biological membrane and other dependent membranes is confirmed. CD is used to determine the speed at which the speed of each interaction is calculated. The above-mentioned time decomposition device is used for the study of the process of biological membrane interaction.