Regulation of membrane traffic by ubiquitination

通过泛素化调节膜运输

• 批准号: 21570213
• 负责人: ICHIMURA Tohru
• 金额: $ 3万
• 依托单位: 防衛大学校
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21570213/
• 关键词: ユビキチン; リン酸化; シグナル伝達; 14-3-3タンパク質; メンブレントラフィック; TRIM32; TRiM32

The relevance of the ubiquitin(Ub)-proteasome system is widely accepted in a variety of cell system. We previously reported a MS-based proteomic technology involving multi-step immunoaffinity purification to characterize signaling complexes in a large scale. In this study we described a novel procedure that combined the technology with newly developed Ub derivatives that inserted a His tag within its C-terminal region. Using this procedure, we successfully identified in vivo ubiquitination sites of over 200 proteins with high confidence. In another experiment, we investigated the crosstalk between phosphorylation and ubiquitination. We found that the ubiquitin E3 ligase TRIM32 binds 14-3-3 proteins in a PKA-catalyzed phosphorylation-dependent manner. Subsequent studies demonstrated that this interaction negatively regulates the catalytic activity and intracellular transport of TRIM32.The findings described herein constitute the first evidence for the regulatory mechanism of the TRIM member.

泛素-蛋白酶体系统的相关性在多种细胞系统中被广泛接受。我们之前报道了一种基于ms的蛋白质组学技术，涉及多步免疫亲和纯化，以大规模表征信号复合物。在这项研究中，我们描述了一种新的程序，将该技术与新开发的Ub衍生物相结合，在其c端区域插入His标签。利用这种方法，我们成功地鉴定了200多种蛋白质的体内泛素化位点，并具有很高的可信度。在另一个实验中，我们研究了磷酸化和泛素化之间的串扰。我们发现泛素E3连接酶TRIM32以pka催化的磷酸化依赖方式结合14-3-3蛋白。随后的研究表明，这种相互作用负调控TRIM32的催化活性和细胞内运输。本文所描述的发现构成了TRIM成员调控机制的第一个证据。

项目成果

二つの新規Beclin1結合タンパク質であるAtg14LとRubiconは、それぞれオートファジーを正負に制御する

两种新型 Beclin1 结合蛋白 Atg14L 和 Rubicon 分别对自噬进行正向和负向调节。

• 发表时间: 2009
• 作者: T. Ichimura;I. Shoji;and N. Hachiya;Tohru Ichimura;市村徹,八谷如美,小俣結子,畠山鎮次勝二郁夫;市村徹;勝二郁夫;吉田順,市村徹,垣内一恵;吉田順;松永耕一,斎藤達哉,田端桂介,大森弘子,佐藤荘,黒鳥直樹,前島郁子,野田桂苗,市村徹,礒辺俊明,審良静男,野田健司,吉森保
• 通讯作者: 松永耕一,斎藤達哉,田端桂介,大森弘子,佐藤荘,黒鳥直樹,前島郁子,野田桂苗,市村徹,礒辺俊明,審良静男,野田健司,吉森保

Two beclin-binding proteins, Atg14L and Rubicon, reciprocally regulate autophagy at different stages

两种 beclin 结合蛋白 Atg14L 和 Rubicon 在不同阶段相互调节自噬

• 发表时间: 2009
• 期刊: Nat Cell Biol VOL.11
• 作者: Matsunaga;K.;Saitoh;T.;Tabata;K.;Omori;H.;Satoh;T.;Kurotori;N.;Maejima;I.;Shirahama-Noda;K.;Ichimura;T.;Isobe;T.;Akira;S.;Noda;T.;& Yoshimori;T.;Matsubaga Koichi
• 通讯作者: Matsubaga Koichi

PKA/14-3-3によるユビキチンリガーゼTRIM32の制御

PKA/14-3-3 对泛素连接酶 TRIM32 的调节

• 发表时间: 2011
• 作者: T. Ichimura;I. Shoji;and N. Hachiya;Tohru Ichimura;市村徹,八谷如美,小俣結子,畠山鎮次勝二郁夫
• 通讯作者: 市村徹,八谷如美,小俣結子,畠山鎮次勝二郁夫

Interaction of nucleosome assembly proteins abolishes nuclear localization of DGKζ by attenuating its association with importins.

• DOI: 10.1016/j.yexcr.2011.09.014
• 发表时间: 2011-12
• 期刊: Experimental cell research
• 影响因子: 3.7
• 作者: M. Okada;Y. Hozumi;T. Ichimura;Toshiaki Tanaka;H. Hasegawa;Masakazu Yamamoto;Nobuya Takahashi;K. Iseki;H. Yagisawa;T. Shinkawa;T. Isobe;K. Goto

E3ユビキチンリガーゼTrim32と14-3-3タンパク質の相互作用と機能解析

E3泛素连接酶Trim32与14-3-3蛋白的相互作用及功能分析

• 发表时间: 2009
• 作者: 吉田順;市村徹;吉田順
• 通讯作者: 吉田順