Charakterisierung neuer Uhrengene im circadianen Modellsystem Neurospora

昼夜节律模型系统脉孢菌中新时钟基因的表征

• 批准号: 5381684
• 负责人: Professor Dr. Till Roenneberg
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Medizinische Psychologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2001-12-31 至 2009-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5381684?language=en
• 关键词: Charakterisierung; neuer; Uhrengene; im; circadianen

Die Beschreibung der molekularen Mechanismen, die der endogenen Tagesrhythmik zugrunde liegen, erzielte im vergangenen Jahrzehnt große Fortschritte. Von Cyanobakterien bis zum Menschen wurden "Uhrengene" charakterisiert, die eine negative Rückkopplung zwischen Transkription und Proteinprodukten bilden. Neuere Experimente zeigen jedoch, dass zahlreiche Aspekte des circadianen Systems auch ohne diesen molekularen Feedback intakt bleiben. Weitere Komponenten müssen also identifiziert werden, um die zellulären Mechanismen der biologischen Tagesuhr umfassend verstehen zu können. Der vorliegende Antrag stellt eine Initiative dar, beim klassischen circadianen Modellsystem Neurospora crassa mit neuen molekulargenetischen Strategien und Methoden sowie mit neuen Screenig-Ansätzen die genetischen Komponenten der inneren Uhr außerhalb des beschriebenen molekularen Feedbacks zu identifizieren. Eine Library von Knockout- und Überexpressions-Mutanten (insertional mutagenesis), wird in spezifischen Temperatur- und Lichtzyklen auf circadiane Abweichungen hin überprüft, und die relevanten Gene durch plasmid rescue identifiziert. Die so gewonnenen Uhren-Mutanten werden auf alle circadianen Qualitäten hin überprüft (Periode, Synchronisation, Temperaturkompensation, etc.). Unsere Vorgehensweise beinhaltet drei Ansätze. (1) Reverse Genetics durch random mutagenesis. Dieser "low risk & high gain" Ansatz hat bereits in ersten Vorversuchen sein großes Potential gezeigt. (2) Forward Genetics bei geeigneten Kandidaten bekannter, am Metabolismus beteiligter Gene, sowie (3) bei Genen, von denen circadiane Wirkungen bereits bekannt sind, die bisher jedoch nicht weiter verfolgt wurden.

分子机制的研究，内源性生物节律的研究，在整个世纪都是巨大的财富。从人的蓝藻中提取的“尿激酶基因”具有特异性，可产生一种负性的转座子和蛋白质产物。新的实验表明，昼夜节律系统的预期也有分子反馈。Weitere Komponenten müssen还确定了韦尔登，um die zellulären Mechanismen der biologischen Tagesuhr umfassend verstehen zu können。本研究的目的是建立粗糙脉孢菌的分子遗传学模型，并采用新的筛选方法对粗糙脉孢菌的遗传学成分进行筛选，以确定粗糙脉孢菌的分子反馈。一个敲除和插入突变表达文库，将在特定温度和特定光照条件下进行生物学行为，并通过质粒拯救鉴定相关基因。Die so gewonnenen Uplan-Mutanten韦尔登auf alle circadianen Qualitäten hin überprüft（周期、同步、温度补偿等）。我们的前舱有三个保险箱。(1)反向遗传学通过随机诱变。这种“低风险高收益”的做法在第一次投资中具有很大的潜力。(2)正向遗传学是一种新的遗传学，它是一种代谢相关的基因，因此（3）在基因组中，由于昼夜节律的关系，它并没有被破坏。