Charakterisierung neuer Uhrengene im circadianen Modellsystem Neurospora

昼夜节律模型系统脉孢菌中新时钟基因的表征

• 批准号: 5381684
• 负责人: Professor Dr. Till Roenneberg
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Medizinische Psychologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2001-12-31 至 2009-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5381684?language=en
• 关键词: Charakterisierung; neuer; Uhrengene; im; circadianen

Die Beschreibung der molekularen Mechanismen, die der endogenen Tagesrhythmik zugrunde liegen, erzielte im vergangenen Jahrzehnt große Fortschritte. Von Cyanobakterien bis zum Menschen wurden "Uhrengene" charakterisiert, die eine negative Rückkopplung zwischen Transkription und Proteinprodukten bilden. Neuere Experimente zeigen jedoch, dass zahlreiche Aspekte des circadianen Systems auch ohne diesen molekularen Feedback intakt bleiben. Weitere Komponenten müssen also identifiziert werden, um die zellulären Mechanismen der biologischen Tagesuhr umfassend verstehen zu können. Der vorliegende Antrag stellt eine Initiative dar, beim klassischen circadianen Modellsystem Neurospora crassa mit neuen molekulargenetischen Strategien und Methoden sowie mit neuen Screenig-Ansätzen die genetischen Komponenten der inneren Uhr außerhalb des beschriebenen molekularen Feedbacks zu identifizieren. Eine Library von Knockout- und Überexpressions-Mutanten (insertional mutagenesis), wird in spezifischen Temperatur- und Lichtzyklen auf circadiane Abweichungen hin überprüft, und die relevanten Gene durch plasmid rescue identifiziert. Die so gewonnenen Uhren-Mutanten werden auf alle circadianen Qualitäten hin überprüft (Periode, Synchronisation, Temperaturkompensation, etc.). Unsere Vorgehensweise beinhaltet drei Ansätze. (1) Reverse Genetics durch random mutagenesis. Dieser "low risk & high gain" Ansatz hat bereits in ersten Vorversuchen sein großes Potential gezeigt. (2) Forward Genetics bei geeigneten Kandidaten bekannter, am Metabolismus beteiligter Gene, sowie (3) bei Genen, von denen circadiane Wirkungen bereits bekannt sind, die bisher jedoch nicht weiter verfolgt wurden.

分子机制的研究，内源性节奏的产生，是在十年内发生的。 Von Cyanobakterien bis zum Menschen wurden “Uhrengene” 特征，是负面的 Rückkopplung zwischen Transkription 和 Proteinprodukten bilden。新的实验包括昼夜节律系统的反馈，以及完整的反馈。 Weitere Komponenten müssen 还可以识别 werden，um die zellulären Mechanismen der biologischen Tagesuhr umfassend verstehen zu können。 Der vorliegende Antrag stellt eine Initiative dar, beim klassischen circadianen Modellsystem crassa crassa mit neuen moleculargenetischen Strategien und Methoden sowie mit neuen Screenig-Ansätzen die Geneticschen Komponenten der insideen Uhr außerhalb des beschriebenen moleculargenetischen Feedbacks zu identifizieren。基因敲除和超表达突变（插入诱变）库，以特殊温度和 Lichtzyklen 方式在昼夜节律中进行检测，并与质粒救援鉴定中的基因相关。 Die so gewonnenen Uhren-Mutanten werden auf alle circadianen Qualitäten hin überprüft（周期、同步、温度补偿等）。 Unsere Vorgehensweise beinhaltet drei Ansätze。 (1) 随机突变的反向遗传学。 Dieser“低风险和高收益”Ansatz 帽子是在 ersten Vorversuchen sein großes Potential gezeigt 中。 (2) 正向遗传学 (Forward Genetics) 是基因代谢的基础，是基因代谢的基础。 (3) 基因、昼夜节律的正向遗传学 (Forward Genetics) 是重要的，是重要的。