Charakterisierung neuer Uhrengene im circadianen Modellsystem Neurospora

昼夜节律模型系统脉孢菌中新时钟基因的表征

基本信息

项目摘要

Die Beschreibung der molekularen Mechanismen, die der endogenen Tagesrhythmik zugrunde liegen, erzielte im vergangenen Jahrzehnt große Fortschritte. Von Cyanobakterien bis zum Menschen wurden "Uhrengene" charakterisiert, die eine negative Rückkopplung zwischen Transkription und Proteinprodukten bilden. Neuere Experimente zeigen jedoch, dass zahlreiche Aspekte des circadianen Systems auch ohne diesen molekularen Feedback intakt bleiben. Weitere Komponenten müssen also identifiziert werden, um die zellulären Mechanismen der biologischen Tagesuhr umfassend verstehen zu können. Der vorliegende Antrag stellt eine Initiative dar, beim klassischen circadianen Modellsystem Neurospora crassa mit neuen molekulargenetischen Strategien und Methoden sowie mit neuen Screenig-Ansätzen die genetischen Komponenten der inneren Uhr außerhalb des beschriebenen molekularen Feedbacks zu identifizieren. Eine Library von Knockout- und Überexpressions-Mutanten (insertional mutagenesis), wird in spezifischen Temperatur- und Lichtzyklen auf circadiane Abweichungen hin überprüft, und die relevanten Gene durch plasmid rescue identifiziert. Die so gewonnenen Uhren-Mutanten werden auf alle circadianen Qualitäten hin überprüft (Periode, Synchronisation, Temperaturkompensation, etc.). Unsere Vorgehensweise beinhaltet drei Ansätze. (1) Reverse Genetics durch random mutagenesis. Dieser "low risk & high gain" Ansatz hat bereits in ersten Vorversuchen sein großes Potential gezeigt. (2) Forward Genetics bei geeigneten Kandidaten bekannter, am Metabolismus beteiligter Gene, sowie (3) bei Genen, von denen circadiane Wirkungen bereits bekannt sind, die bisher jedoch nicht weiter verfolgt wurden.
Die Beschreibung der Molekularen机构,Die der der der derenen tagesrhythmik zugrunde liegen,erzielte im vergangenen jahrzehntgroßefortschritte。 von cyanobakterien bis zum menschen wurden“ uhrengene” charakterisiert,eine eine natumrückkopplungzwischen transkriptim and proteinprodukten bilden。 Neuere Experimente Zeigen Jedoch,dass Zahlreiche aspekte des Circadianen Systems Auch ohne Diesen Molekularen反馈插入bleiben。 WeitereKomponentenMüssen也识别了Werden,Um DieZellulären机构Der Biologischen Tagesuhr umfassend umfassend verstehenZuKönnen。 Der vorliegende Antrag stellt eine Initiative dar, beim klassischen circadianen Modellsystem Neurospora crassa mit neuen molekulargenetischen Strategien und Methoden sowie mit neuen Screenig-Ansätzen die genetischen Komponenten der inneren The Eine Library is a leader in the area of​​ ​​Mutanten (insertional mutagenesis), and the Lichtzyklen Abweichhungen Abweichungen abweichungen abweichungen abweichungen abweichungen -Hinder -Hinderüberprüft和遗传durch质粒救援识别中的wird。 Eine文库是Mutanten地区的领导者(插入诱变),在Lichtzyklen Abweichungen -Hinder -Hinderüberprüft(浮游生物,同步,温度,温度等等)中的Wird。 Unsere Vorgehensweise beinhaltet。 (1)反向遗传学诱变随机诱变。 dieser“低风险和高增益” Ansatz帽子在vorversuchenseingroßes潜在的gezeigt中。 (2)向前遗传学Beigeigneten Kandidaten Bekannter,AM代谢Beteiligter Gene,Sowie(3)Bei Genetics,Von Denen Cigadian Cycadian Bereits Bekannt Bekannt Bekannt Sind,Die Bisher Jedoch Jedoch Jedoch Nicht Nicht Weiter Weiter Verfolgt Wurden。

项目成果

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