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細胞間コミュニケーションの時空間的解析手法の確立

细胞间通讯时空分析方法的建立

基本信息

批准号：
21650118
负责人：
寺村裕治
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21650118/
关键词：
ES細胞細胞間相互作用分化誘導表面修飾

项目摘要

細胞間の相互作用は生体反応において、重要な役割を果たしているものの、いまだ解析手法は確立されていない。異なる細胞を自由に配列することが可能になれば、細胞間相互作用の解析に良いツールが提供できるものと考えられる。我々のグループでは、分子内に疎水部と親水部を持つ両親媒性高分子を合成し、その疎水部と細胞膜の脂質二重層との疎水性相互作用によって細胞表面への両親媒性高分子の固定を試みてきた。本研究では、異なる二種類の細胞間の相互作用を調べるために、両親媒性高分子とビオチンとストレプトアビジンの強力な結合により細胞間の接着を引き起こし、細胞の配列を試みた。具体的には、ビオチン基を末端に有するポリエチレングリコール結合脂質(ビオチンPEG脂質)にて細胞を表面修飾してビオチン基を導入し、他方の細胞には、同処理を行った後、ストレプトアビジンを反応させて、ストレプトアビジンを細胞表面に固定した。両者を混合することによって異なる細胞間の接着を引き起こした。この手法を利用し、マウス胚性幹細胞(ES細胞)の胚様体周囲に異種細胞を固定し、細胞間相互作用によるES細胞の分化の様子を経時的に観察した。フィーダー細胞であるPA6細胞と相互作用しているES細胞の領域から神経への分化の促進が見られ、分化誘導が引き起こされていた。他方、コントロールの細胞(HEK293細胞)を固定化した胚様体では、神経マーカーの発現は全く見られなかった。このことは、HEK293細胞と胚様体間の相互作用により、ES細胞の分化が抑制されたためと考えられる。このように、両親媒性高分子及びビオチン、ストレプトアビジンを用いることによって、異なる細胞同士の接着が可能となり、細胞間相互作用を調べることが可能になった。ES細胞に異種細胞を接着させ、その分化状態を経時観察することにより、細胞間の相互作用を観察することができた。

The interaction between cells is the result of biological reaction, important service, and analytical methods. Different cells are arranged freely, and the analysis of cell-cell interaction is good. In this paper, we try to fix the hydrophilic polymer on the surface of the cell by the interaction between the hydrophilic part and the hydrophilic part of the molecule, and the synthesis of the hydrophilic polymer. In this study, the interaction between two kinds of cells was modulated, and the strong binding between two kinds of polymers and cells was tested. Specific cell surface modification and introduction of the protein group at the end of the protein group, and immobilization of the protein group on the cell surface after the same treatment. A mixture of two or more cells. These techniques are used to investigate the effects of embryonic stem cells (ES cells) on the development of embryos, on the fixation of xenogeneic cells, and on cell-cell interactions. PA6 cells interact with ES cells in the field of neurodifferentiation and differentiation induction. Other cells (HEK293 cells) were immobilized in vitro and developed in vitro. HEK293 cells and embryo interactions, ES cell differentiation and inhibition The interaction between cells may be modulated by the interaction between cells. ES cells are heterogeneous cells, and their differentiation status is monitored.