パーキンソン病発症機転における受容体活性化CaチャネルTRPC6蛋白質の役割解明

阐明受体激活Ca通道TRPC6蛋白在帕金森病发病机制中的作用

基本信息

批准号：
09F09134
负责人：
井上隆司
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Fukuoka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2011
项目状态：
已结题

项目摘要

来日時(平成21年8月中旬)より今日までの約八ヵ月間に、以下の三点について研究を進めた。1.TRPC6チャネルのカルモジュリン依存性キナーゼ(CaMKII)のリン酸化による制御分子機構の解明を行った。CaMKIIのリン酸化モチーフのアラニン置換体を作成し、リン酸化に関与する責任部位の同定をパッチクランプ法で行った結果、II-III細胞内ループにある487番目のthreonineのリン酸化が、TRPC6の活性化に必須であることを見いだした。更に、この分子機構が、血管由来細胞A7r5においても作動していることを確認した。この機構は、中枢におけるCaMKIIが果たす役割を考慮すると、記憶・学習などに関与する可能性のある極めて重要な分子機構であることが予想され、パーキンソン病における脳機能障害との関連が考えられる。今後は、この点について、神経細胞を用いて検討する。2.CaMKIIによるリン酸化を長期間阻害すると、TRPC6の自発的な活性化が生じ、細胞障害的なCa^<2+>過負荷が起こることを見出した。これも、神経細胞の変性を惹起する機序として、パーキンソン病発症に関わる可能性があり、今後神経細胞における検討を行う予定である。3.免疫組織化学的検討によって、ラット脳質内にコルヒチン、6-OHDAを注入して、黒質における神経変性を惹起すると、これに併行して、TRPC6の発現増加が起こることを見出した。この機序は、2の実験結果とも関連して、パーキンソン病発症過程に重要な寄与をしている可能性が考えられる。平成22年度は、これらの結果について、神経細胞(急性単離及び一次培養系)における検討を行う予定である。

自从他访问日本（8月中旬）以来的大约八个月中，他对以下三分进行了研究。 1。我们通过TRPC6通道中钙调蛋白依赖性激酶（CAMKII）的磷酸化研究了调节分子机制。创建了CAMKII磷酸化基序的丙氨酸取代，并通过斑块夹具进行了鉴定参与磷酸化的负责位点，并且在II-IIII III细胞内环中487在487在487的磷酸化对于TRPC6激活而言是必不可少的。此外，已经证实，该分子机制在血管衍生的细胞A7R5中也有效。考虑到Camkii在中部地区的作用，预计该机制将是一种非常重要的分子机制，可能参与记忆，学习等，并且可能与帕金森氏病中的脑功能障碍有关。将来，我们将使用神经元考虑这一点。 2。我们发现，CAMKII长时间抑制磷酸化会导致TRPC6自发激活，从而导致细胞毒性CA^<2+>过载。这也可能参与帕金森氏病的发作，作为诱导神经元变性的机制，我们计划将来研究神经元细胞。 3。免疫组织化学研究发现，大鼠脑中的秋水仙碱和6-OHDA诱导了黑质的神经变性，从而导致TRPC6的表达增加。这种机制与两个实验的结果结合在一起，可能对帕金森氏病的发展有重要贡献。在2010年，这些结果将在神经元（急性隔离和原发性培养系统）中进行检查。