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ブタ卵胞発達, 排卵機構の分子生物学的解析による新規体外成熟培養法の開発

基于猪卵泡发育和排卵机制分子生物学分析开发新型体外成熟培养方法

基本信息

批准号：
09J04118
负责人：
川島一公
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2011
项目状态：
已结题

项目摘要

申請者は,ブタ体内の卵子成熟機構である卵胞発達と排卵機構を理解するために,マーカー遺伝子の絞り込みとして,マウスを用いて研究を行ってきた.前年度までに,排卵過程で,ブタ,マウス共にEGF like factorが卵の成熟機構に大きく寄与すること,また既知のEGF like factor以外に新たに新規のEGF like factorであるNeuregulin1(NRG1)が発現していることを見出した.そのため,本年度は,(1)遺伝子改変が容易なマウスを用いて,卵巣特異的ノックアウトマウスを作成し,その形質を検討した.さらに,(2)排卵過程でEGF like actorが誘起する卵成熟の新たな生理機構を明らかにすることに成功した.(1)卵成熟を誘起する卵丘細胞,顆粒層細胞特異的にNRG1をノックアウトするNRG1flox/flox Cyp19-Creマウスを作製した.この雌マウスは,産子数が有意に減少し,早期閉経を呈することが明らかになりつつある.現在は引き続き雌マウスのフェノタイプを詳細に調べている.(2)これまで,LH刺激後に誘起されるEGF like factorが誘起する卵丘細胞卵複合体が卵胞内に遊離する現象である卵丘細胞卵複合体の膨潤のメカニズムを初めて明らかにした.この一連の現象は,ガン細胞で認められるEGF like factor刺激が誘起するCalpain活性による細胞遊走が原因であった.これらは,マウス,ブタ両者でCalpainが認められ,哺乳動物共通の機構であることも見出している.さらにタイムラプスを用いた研究によって,これらの細胞が拡散モデルと酷似したパターンで広がっていること,In silicoによる再現実験でも卵丘細胞の膨潤にみられる形態が観察できた.現在これらを論文にまとめ,投稿中である.

The applicant shall conduct research on egg maturation mechanism in vivo, egg development mechanism and ovulation mechanism. In the past year, during ovulation, a total of EGF like factors have been found in the mature organs of the egg, and a new EGF like factor has been found in addition to the known EGF like factors. This year, we have: (1) The change of the seed is easy to use, and the special change of the seed is easy to make, and the quality of the seed is discussed. (2) EGF-like actors induce egg maturation, and new physiological mechanisms are identified for successful ovulation. (1)Egg maturation is induced by cumulus cells, granular layer cell-specific NRG1 flox/flox Cyp19-Cre The number of children born is intentionally reduced, and the number of children born in the early stage is reduced. Now it's time to go to the bathroom. (2)After LH stimulation, EGF-like factors induced cumulus cell-egg complexes to dissociate from egg cells. This phenomenon is related to the recognition of EGF-like factors in cells, which induce Calpain activity and cell migration.これらは,マウス,ブタ両者でCalpainが认められ,哺乳动物共通の机构であることも见出している. In this study, the cumulus cells were observed to be similar to the cumulus cells. Now I'm writing a paper, and I'm writing it.