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P450c17変異メダカからアップデートする魚類における副腎皮質ホルモンの役割

P450c17 突变青鳉鱼中肾上腺皮质激素的作用

基本信息

批准号：
09J04892
负责人：
高橋英也
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Okayama University (2011)Niigata University (2009-2010)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2011
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、魚類では不明のミネラルコルチコ千ド系の役割を、遺伝子変異メダカを用いて明らかにすることを目的としている。昨年度は、Targeting Induced Local Lesions In Genomes(TILLING)法によりミネラルコルチコイド受容体(MR)遭伝子を人為的に破壊したメダカの作製を試みた。MR-遺伝子の変異スクリーニング結果では、リガンド結合領域をゴードする第4エクソン上に3種のアミノ酸置換を生じるミスセンス変異(754番目のロイシンがプロリン(P754)、767番目のスレオニンがアラニン(A767)、770番目のアスパラギン酸がグルタミン酸(E770))が同定された。本年度は、同定されたこれら受容体の転写活性をレポーター遺伝子アッセイ法により解析した。コルチゾルや11-デオキシコルチコステロンなどの副腎皮質ホルモンに対して、A767は野生型と同程度の転写活性を有していたが、P754は野生型より強い転写活性を示した。一方、E770はいずれの副腎皮質ホルモンに対しても転写活性を喪失していた。以上より、リガンド結合機能が喪失した変異体の作出に成功した。また、MRはメダカでは中脳視蓋や小脳顆粒層に多く存在していることから、胚期のメダカの行動をモニターする装置を開発した。胚期のメダカが1時間あたり数回動くことを確認している。この装置を用いて、E770の行動を解析する予定である。

The purpose of this study is to make clear that the purpose of this study is to ensure that the purpose of this study is to improve the accuracy of the system. Last year, the Targeting Induced Local Lesions In Genomes (TILLING) method was used to verify that the MR was tested by a man-made device. The results of the MR- experiment were compared with the results of the experiments in the field. In the fourth chapter of the database, there were three kinds of health care products (P754), 767 (A767) and 770 (E770). This year, it is the same to determine that the capacitor will write the activity of the capacitor in the current year. The writing activity of the wild type of A767 is the same as that of the wild type of A767, and that of the wild type of P754 is strong. On the other hand, the E770 device is used to make sure that the writing activity is lost. The above information and information can be combined with the mechanism to make a successful decision. There is a large number of small grains in the middle of the MR and the embryo stage, and the equipment is on operation. During the embryo period, the number of cycles in the first half of the day will be returned to confirm the error rate. The equipment is used to analyze the behavior of the equipment by using the E770 and the E770.