寄生虫ミトコンドリアの特異的エネルギー転換機構に関する分子進化学的研究

寄生虫线粒体特定能量转换机制的分子进化研究

• 批准号: 09J05920
• 负责人: 増田 功
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J05920/
• 关键词: ミトコンドリア; 遺伝子発現系; パーキンサス; フレームシフト; アピコンプレックス類; 渦鞭毛藻類; 寄生虫; 電子伝達鎖; ミトコンドリアゲノム; 分子進化

本研究の目的は、貝類寄生虫Perkinsusのミトコンドリア遺伝子発現系や電子伝達鎖の解析を行うことにより、近縁生物群アピコンプレックス類や渦鞭毛藻類のミトコンドリアにおける遺伝子発現の特性について進化学的知見を得ることである。昨年度までの研究から、Perkinsusのミトコンドリア遺伝子Pmcox1の発現において、AGGとCCCコドンにおける極めて高頻度なフレームシフトが起こっていることを明らかにした(Masuda et al.,2010)。当研究室において構築した近縁種のP.olseniのドラフトゲノムデータベースからPmcox1と96%塩基配列が一致するDNA配列を見出し、それが10か所のフレームシフトモチーフを全て保存していることを確認した。またP.marinus cob様配列に極めて類似した配列も見出され、5か所のフレームシフトモチーフを完全に保存していた。このことから、このフレームシフトは広くPerkinsus属のミトコンドリア遺伝子の発現に起こっていると考えられた。続いてPerkinsusのミトコンドリア電子伝達鎖複合体の精製や生化学的解析を視野に入れ細胞破砕・分画条件を検討したが、高純度で高活性を示すミトコンドリア画分を得ることはできなかった。一方でP.marinus形質転換ベクターを用いたGFP融合ミトコンドリアタンパク質発現株を作成できたことから、今後この株を利用したミトコンドリア画分の調製を進めることが可能となった。また、前述のP.marinusの粗オルガネラ画分を用いた生化学的解析から、ミトコンドリア電子伝達鎖複合体I-IV、Alternative Oxidase (AOX)の活性が確認された。Pmcox1の発現産物が活性中心となる複合体IVの活性は、その特異的阻害剤KCNの添加により完全に阻害されたことから、Pmcox1が実際に発現し電子伝達鎖を構成していると考えられた。

The purpose of this study is to analyze the characteristics of Perkinsus parasites, parasites, parasites Last year's study was conducted, Perkinsus

项目成果

Extensive ribosomal frameshift suggested in mitochondria of a parasitic dinoflagellate Perkinsus

寄生甲藻 Perkinsus 线粒体中存在广泛的核糖体移码

• 发表时间: 2009
• 作者: Hiromitsu Miyata;Shigeru Watanabe;Yasuyo Minagawa-Kawai;宮田裕光・皆川泰代・渡辺茂;宮田裕光・藤田和生;佐藤奈緒;増田功・松崎素道・北潔;増田功・松崎素道・北潔;増田功
• 通讯作者: 増田功

寄生性渦鞭毛藻パーキンサスに見出されたフレームシフトを伴うミトコンドリア遺伝子発現系

在寄生甲藻 Perkinsus 中发现具有移码的线粒体基因表达系统

• 发表时间: 2010
• 作者: Hiromitsu Miyata;Shigeru Watanabe;Yasuyo Minagawa-Kawai;宮田裕光・皆川泰代・渡辺茂;宮田裕光・藤田和生;佐藤奈緒;増田功・松崎素道・北潔
• 通讯作者: 増田功・松崎素道・北潔

貝類寄生虫Perkinsusのミトコンドリアにおける高頻度なフレームシフトを伴う遺伝子発現系

贝类寄生虫 Perkinsus 线粒体中频繁移码的基因表达系统

• 发表时间: 2010
• 作者: Hiromitsu Miyata;Shigeru Watanabe;Yasuyo Minagawa-Kawai;宮田裕光・皆川泰代・渡辺茂;宮田裕光・藤田和生;佐藤奈緒;増田功・松崎素道・北潔;増田功・松崎素道・北潔
• 通讯作者: 増田功・松崎素道・北潔