Realization of a secure and safe proteinaceous-insecticide based on the directed evolution of the insecticidal toxin from soil bacterium, Bacillus thuringiensis

基于土壤细菌苏云金芽孢杆菌杀虫毒素的定向进化，实现安全可靠的蛋白质杀虫剂

• 批准号: 21310051
• 负责人: SATO Ryoichi
• 金额: $ 11.81万
• 依托单位: Tokyo University of Agriculture and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21310051/
• 关键词: 環境負荷低減技術; 殺虫剤; Cry toxin; 進化分子工学; Bacillus thuiringiensis; タンパク質殺虫剤; カドヘリン様受容体; Bacillus thuringiensis

It was indicated that Cry toxin mutants affinity-maturated to cadherin-like receptor is expected to be easily acquired, if mutation is introduced in loop 2 or loop 3 of Cry toxin, mutant Cry toxins are displayed on the T7 phage, and mutant-toxin-displaying phages are screened by bio-panning using cadherin-like receptor. That is to say, base technology was developed for the directed evolution of Cry toxin by which any available Cry toxins are possible to be changed to be highly active to any insect pests

研究表明，通过在Cry毒素的第2环或第3环引入突变，将突变的Cry毒素展示在T7噬菌体上，并利用钙粘蛋白样受体通过生物淘选筛选出展示Cry毒素的噬菌体，可以很容易地获得与钙粘蛋白样受体亲和力成熟的Cry毒素突变体。也就是说，开发了用于Cry毒素的定向进化的基础技术，通过该基础技术，任何可用的Cry毒素都可能被改变为对任何昆虫害虫具有高度活性

项目成果

バイオパニング法を用いて選抜されたBtR175高親和性Cry1Aa変異体の解析

使用生物淘选方法筛选的 BtR175 高亲和力 Cry1Aa 突变体的分析

• 发表时间: 2011
• 作者: 藤井勇樹;他3名
• 通讯作者: 他3名

Bombyx mori midgut epithelial cells' reaction induced by Cry1Aa includes both or either of osmotic swelling and apoptosis depending on toxic

Cry1Aa诱导家蚕中肠上皮细胞的反应包括渗透性肿胀和细胞凋亡两者或其中之一，取决于毒性

• 发表时间: 2011
• 作者: Shiho Tanaka;他2名
• 通讯作者: 他2名

変異体を用いたBt菌Cry毒素のループ部位の受容体結合和性における役割の解析

使用突变体分析 Bt 细菌 Cry 毒素环位点在受体结合亲和力中的作用

• 发表时间: 2010
• 作者: 藤井勇樹;他5名
• 通讯作者: 他5名

Cry1A毒素に対する宿主昆虫感受性の決定に関与する2分子の解析

分析参与确定宿主昆虫对 Cry1A 毒素敏感性的两个分子

• 发表时间: 2011
• 作者: 田中詩穂;他3名
• 通讯作者: 他3名

Binding affinity improvement of the Cry1Aa toxin to the cadherin-like protein, BtR175 from Bombyx mori using phage display of loop 3 mutant toxins and bio-panning

使用环 3 突变毒素的噬菌体展示和生物淘选提高 Cry1Aa 毒素与来自家蚕的钙粘蛋白样蛋白 BtR175 的结合亲和力

• 发表时间: 2011
• 作者: Fujii Y;Otsuki M;Hoshino Y;Sato R
• 通讯作者: Sato R