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Development of discovering technology to quantify the biomarker for minimally invasive diagnostics.

开发量化微创诊断生物标志物的发现技术。

基本信息

批准号：
21790173
负责人：
鎌田春彦
金额：
$ 2.75万
依托单位：
National Institute of Biomedical Innovation
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

The proteins they express at the time of disease and which are related to organ dysfunction are poorly characterized. Our group has developed a general chemical proteomics approach for the identification of biomarker proteins. The aim of this study was to identify protein biomarkers present in sinusoidal endothelial cells following hepatic injury using chemical proteomics employing in vivo biotinylation. We performed a proteomic study in a mouse model of massive hepatocyte apoptosis in tumor necrosis factor (TNF)/D-(+)-galactosamine (GalN) animals induced by the combined administration of GalN and TNF. In vivo biotinylation was carried out by perfusing mice with a reactive ester derivative of biotin that enables the covalent modification of proteins. Protein expression was analyzed using purified proteins from hepatitic and normal livers. The biotinylated proteins were purified from liver extracts using streptavidin beads, digested on the resin by trypsin and subjected to mass spectrometry for identification. These results indicate that the sinusoidal endothelial biomarkers expressed on liver injury reflect the molecular pathobiology and the mechanisms of hepatitis induction.

它们在发病时所表达的与器官功能障碍有关的蛋白质的特征却很少。我们的团队开发了一种通用的化学蛋白质组学方法来鉴定生物标记蛋白。本研究的目的是利用体内生物素化的化学蛋白质组学技术，鉴定肝损伤后血管内皮细胞中存在的蛋白质生物标志物。我们对肿瘤坏死因子(TNF)/D-(+)-半乳糖胺（GalN）联合给药诱导大量肝细胞凋亡的小鼠模型进行了蛋白质组学研究。体内生物素化是通过向小鼠灌注生物素的活性酯衍生物来进行的，这种酯衍生物能够对蛋白质进行共价修饰。用纯化的肝和正常肝脏蛋白分析蛋白表达。用链霉亲和素珠从肝脏提取物中纯化生物素化蛋白，用胰蛋白酶在树脂上消化，并用质谱法进行鉴定。这些结果表明，肝损伤中表达的血管内皮生物标志物反映了肝损伤诱导的分子病理生物学和机制。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

The specific effect of 2-Methoxyestradiol on lymphatic vascular endothelial cells

2-甲氧基雌二醇对淋巴管内皮细胞的特异性作用

DOI：
发表时间：
期刊：
Pharmazie (In press)
影响因子：
0
作者：
Imai S.;Yoshida Y.;Nagano K.;Abe Y.;Kamada H.;Nakagawa S.;Tsunoda S.;Tsutsumi Y.
通讯作者：
Tsutsumi Y.

Arsenic trioxide alters expression and oxidative modification of the proteome in leukemic cells.

三氧化二砷改变白血病细胞中蛋白质组的表达和氧化修饰。

DOI：
发表时间：
2010
期刊：
Pharmazie 65
影响因子：
0
作者：
Nabeshi H.;Yoshikawa T.;Kamada H.;Shibata H.;Sugita T.;Abe Y.;Nagano K.;Nomura T.;Minowa K.;Tsunoda S.;Tsutsumi Y.
通讯作者：
Tsutsumi Y.

Generation of mouse macrophages expressing membrane-bound TNF variants with selectivity for TNFR1-or TNFR2

产生表达膜结合 TNF 变体的小鼠巨噬细胞，并对 TNFR1 或 TNFR2 具有选择性

DOI：
发表时间：
期刊：
Cytokine (in press)
影响因子：
0
作者：
Shibata H.;Abe Y.;Yoshioka Y.;Nomura T.;Sato M.;Kayamuro H.;Kawara T.;Arita S.;Furuya T.;Nagano K.;Yoshikawa T.;Kamada H.;Tsunoda SI.;Tsutsumi Y
通讯作者：
Tsutsumi Y

Improved protein sequence coverage by on resin deglycosylation and cysteine modification for biomarker discovery.

通过树脂去糖基化和半胱氨酸修饰提高蛋白质序列覆盖率，以发现生物标志物。