Development of an Efficient Method for Creating Bispecific Antibodies by Mixing

开发通过混合创建双特异性抗体的有效方法

基本信息

批准号：
22K19119
负责人：
鎌田春彦
金额：
$ 4.08万
依托单位：
National Institutes of Biomedical Innovation, Health and Nutrition
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-06-30 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K19119/
关键词：
抗体

项目摘要

本研究では、単純かつ効率的に二重特異性抗体の創出が可能な新しい抗体作製技術を、タンパク質を「混ぜる」という観点から開発することを目的とする。抗体のもつ4つのサブクラスのうち、特定のサブクラスで自然に抗体の長鎖同士が交換反応を起こすIgG4をベースにしたFab-arm exchange技術を応用し、二重特異性抗体の創出を目指す。IgG4は抗体医薬品の中でも、Fc受容体への結合性が低いため、Fc-dependentに起こる生体反応を除去するために応用が進みつつあるが、一般的な抗体医薬品のサブクラスはIgG1であり、このIgG1をベースにFAEが生じる技術の構築を目指す。本年度は、免疫チェックポイント阻害薬のターゲットである、PD-1とPD-L1に対する抗体の二重特異性抗体を作製することを目指した。今後、マウスとヒトの両者で結合可能な二重特異性抗体を作製するために、マウスとヒトにクロスする抗PD1抗体および抗PD-L1抗体を選出した。抗PD-L1抗体、および抗PD-L1抗体として市販されている合計8種類の抗体の、抗原への反応性を検討した。その中で、抗PD-L1抗体として知られるAvelumabは、ヒトとマウスのPD-L1の両者に結合する抗体であることが明らかになり、本抗体を抗PD-L1抗体として選出した。一方で、マウスとヒトの両者に結合するPD1抗体は見つからなかったために、ヒトPD1抗体としては、Cerrelimab、マウスPD1抗体としては、RNP1-14抗体を選出した。各抗体の配列をヒトIgG1をベースにしたキメラ抗体を作製し、現在FAEの条件の最適化を実施しているところである。

这项研究旨在开发一种新的抗体生产技术，该技术允许从“混合”蛋白的角度简单有效地产生双特异性抗体。在抗体的四个亚类中，是基于IgG4的Fab-Arm交换技术的特定亚类，其中自然出现在它们之间的抗反应中的抗体的长链，用于创建双特异性抗体。在抗体药物中，IgG4与FC受体的结合较低，并且正在应用于去除FC依赖性中发生的生物反应，但是IgG1是一般抗体药物的子类，我们旨在构建一种基于此IGG1的技术。今年，我们旨在生成针对PD-1和PD-L1抗体的双特异性抗体，这些抗体是免疫检查点抑制剂的靶标。将来，选择了横小鼠和人类的抗PD1和抗PD-L1抗体，以产生能够与小鼠和人类结合的双特异性抗体。研究了抗PD-L1抗体的抗原的反应性和作为抗PD-L1抗体的八种抗体可用的八种类型的抗体。其中，avelumab（称为抗PD-L1抗体）被揭示为与人和小鼠PD-L1结合的抗体，并且该抗体被选为抗PD-L1抗体。另一方面，没有发现与小鼠和人类结合的PD1抗体，因此选择切美列赛作为人PD1抗体，然后选择RNP1-14抗体作为小鼠PD1抗体。基于每种抗体的序列的嵌合抗体是基于人IgG1产生的，目前正在优化FAE的条件。