ヒト細胞の再生医療における移植源としての有用性を評価する新規動物システムの確立

建立新的动物系统来评估人类细胞作为再生医学移植来源的有效性

基本信息

  • 批准号:
    21790214
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.83万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 财政年份:
    2009
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2009 至 2010
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

NOGマウスの体細胞は遺伝子改変に起因する脆弱性を伴っており、NOGマウス由来線維芽細胞への山中4因子の導入では、iPS細胞を作成することはできなかった。申請者は体性幹細胞の一種である間葉系幹細胞(MSC)への4遺伝子導入により、生体由来の線維芽細胞への遺伝子導入よりも高い効率でiPS細胞を誘導できることに着目した。マウスの骨髄から得られた細胞群に対し、FACSシステムを用いて白血球系のマーカーであるCD45を発現している細胞および赤血球マーカーであるTer119陽性細胞を除去し、残った細胞群からMSCのマーカーであるPDGFRα(platelet derived growth factor receptor α)およびSca-1(Stem cell antigen-1)を共に発現する細胞を収集することでマウスMSCを得ることができる(Morikawa et al; J Exp Med. 2009 Oct 26; 206(11): 2483-96)。申請者は、この方法で得たNOGマウスMSCに上記の4遺伝子を導入し、NOGマウスiPS細胞の樹立に成功した。しかしこれらの細胞のBlastcyst injectionではキメラマウスは得られなかった。そこで、申請者はさらに高確率で生殖細胞に分化可能なNOGマウスiPS細胞を樹立するため、c-mycを除いたoct3/4、klf4、sox2の3因子導入によるNOGマウスiPS細胞の樹立を行った。3因子導入により樹立されたNOGマウスiPS細胞は、通常のES細胞培地では分化してしまったが、申請者はiPS細胞の未分化状態維持に寄与することが知られているMEK inhibitor, GSK inhibitor, TGF-β inhibitor (Sheng Ding et al; Cell Stem Cell, 2009)を培地に添加し、3因子導入によるNOGマウスiPS細胞の樹立・維持に成功した。
NOG cells are transformed into somatic cells, resulting in vulnerability. NOG cells are transformed into vascular cells, resulting in the introduction of 4 factors into iPS cells. The applicant has four genes introduced into mesenchymal stem cells (MSC), one type of somatic stem cells, and iPS cells with a high induction rate. The cell population was identified by FACS and the CD45 positive cells were removed from the leukocyte population. PDGFRα (platelet derived growth factor receptor α)およびSca-1 (Stem cell antigen-1) is commonly found in cells (Morikawa et al; J Exp Med. 2009 Oct 26; 206(11): 2483-96). The applicant has successfully established NOG cells by introducing 4 genes into NOG cells. The Blastcyst injection of a cell is a reaction to the reaction. In addition, the applicant has a high accuracy rate of germ cell differentiation and establishment of NOG cells, c-myc and oct3/4, klf4 and sox2. 3 factors were introduced into NOG iPS cells, which were successfully established and maintained in vitro by MEK inhibitor, GSK inhibitor and TGF-β inhibitor (Sheng Ding et al; Cell Stem Cell, 2009).

项目成果

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会议论文数量(0)
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知道了