糖尿病性腎症の発症・進展におけるエンドセリンおよび一酸化窒素合成酵素の包括的解析

本研究は、糖尿病性腎症をモデルとし、病的状態におけるエンドセリン系と一酸化窒素系との生体内相互作用を遺伝子操作マウスを用いて解明することを目的とする。具体的には、糖尿病性腎症において、(1)腎糸球体内皮細胞由来の過剰なエンドセリンが腎糸球体上皮細胞の機能障害をきたすこと、(2)エンドセリンによる腎糸球体上皮細胞の障害を腎糸球体内皮細胞由来の一酸化窒素が抑制すること、(3)血管内皮細胞の一酸化窒素の発現はエンドセリンによって増強されること、の三点を生体内で証明することである。当該年度では、平成23年度に作製したエンドセリン過剰発現マウス/一酸化窒素合成酵素欠損マウスおよびエンドセリン欠損マウス/一酸化窒素合成酵素過剰発現マウスを用いて、その表現型を解析した。具体的には、糖尿病発症後8週目のマウスを初期糖尿病腎症、同21週目を後期糖尿病腎症として下記項目について解析した。(1)腎バリア機能に関与するポドサイトの形態学的変化について走査型電子顕微鏡を用いて評価すし、ポドサイトの形態維持にエンドセリンと一酸化窒素が相補的に作用していることを示した。(2)腎小体の局所におけるエンドセリン、エンドセリン受容体、一酸化窒素合成酵素などの発現をレーザーマイクロダイセクション法と定量的PCR法を用いて定量評価し、腎小体におけるエンドセリン系と一酸化窒素系の相互作用を示すことができた。現在、上記知見をまとめた論文を作成中であり、国際一流誌に投稿の予定である。

本研究は、糖尿病性腎症をモデルとし、病的状態におけるエンドセリン系と一酸化窒素系との生体内相互作用を遺伝子操作マウスを用いて解明することを目的とする。具体的には、糖尿病性腎症において、(1)腎糸球体内皮細胞由来の過剰なエンドセリンが腎糸球体上皮細胞の機能障害をきたすこと、(2)エンドセリンによる腎糸球体上皮細胞の障害を腎糸球体内皮細胞由来の一酸化窒素が抑制すること、(3)血管内皮細胞の一酸化窒素の発現はエンドセリンによって増強されること、の三点を生体内で証明することである。当該年度では、平成23年度に作製したエンドセリン過剰発現マウス/一酸化窒素合成酵素欠損マウスおよびエンドセリン欠損マウス/一酸化窒素合成酵素過剰発現マウスを用いて、その表現型を解析した。具体的には、糖尿病発症後8週目のマウスを初期糖尿病腎症、同21週目を後期糖尿病腎症として下記項目について解析した。(1)腎バリア機能に関与するポドサイトの形態学的変化について走査型電子顕微鏡を用いて評価すし、ポドサイトの形態維持にエンドセリンと一酸化窒素が相補的に作用していることを示した。(2)腎小体の局所におけるエンドセリン、エンドセリン受容体、一酸化窒素合成酵素などの発現をレーザーマイクロダイセクション法と定量的PCR法を用いて定量評価し、腎小体におけるエンドセリン系と一酸化窒素系の相互作用を示すことができた。現在、上記知見をまとめた論文を作成中であり、国際一流誌に投稿の予定である。