新規幹細胞マーカーDclk1を利用した大腸癌治療の基礎的検討

使用新型干细胞标记物Dclk1治疗结直肠癌的基础研究

基本信息

批准号：
10J02434
负责人：
中西祐貴
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010 至 2012
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10J02434/
关键词：
消化管幹細胞大腸癌癌幹細胞 Dclk1

项目摘要

研究代表者らは消化管の幹細胞マーカー候補として報告されているmicrotuble-associated kinase、doublecortin and CaM kinase-like-1(以下Dclk1)に注目し、正常腸管および腸腫瘍における役割の解析を行っている。平成24年度は以下の実験を中心に行った。1.Dclk1-CreERT2/Rosa26R/ApcMinマウスを用いた腸腫瘍におけるlineage tracing解析.昨年度(平成23年度)に作出に成功したDclk1-CreERT2/Rosa26R/ApcMinマウスにタモキシフェンを投与し、lineage tracing解析を行った。非常に興味深いことに、正常腸管とは異なり、タモキシフェン投与7日後には、腸腫瘍全体,が青い細胞、すなわちDclk1+細胞とその子孫細胞によって置き換えられてしまった。経過を追ったところ、タモキシフェン投与1日後は腸腫瘍中でDclk1+細胞のみが青く散在性に染色された。時間が経つにつれて、次第に腫瘍底部のDclk1+細胞から管腔側に向けて青いlineageのリボンが形成されていき、5～7日後にはほぼ腫瘍全体が青い細胞によって置き換えられた。そして、この青い腸腫瘍は、観察可能であったタモキシフェン投与105日後までそのまま残存していた。この結果から、腸腫瘍中のDclk1陽性細胞は「自己再生能」と「子孫細胞供給能」をあわせ持つ腫瘍幹細胞であることが明らかになった。2.Dclk1陽性細胞のアブレーションが正常腸管および腸腫瘍に及ぼす影響についての検討.さらに、Dclk1陽性細胞を標的とする抗腫瘍治療への発展について検討するため、Cre誘導下にジブテリアトキシン受容体を発現させるRosa26-iDTRマウスをDclk1-CreERT2/Rosa26-LacZ/ApcMinマウスと交配し、正常腸管および腸腫瘍においてジフテリアトキシン投与によるDclk1陽性細胞の選択的障害を行った。結果、正常腸管には障害を及ぼさず。腸腫瘍のみが退縮あるいは消失した。以上の結果よりDclk1は腸腫瘍幹細胞の特異的マーカーであると考えられ、今後Dclk1陽性の腫瘍幹細胞を標的とする治療への発展が期待される。

研究人员专注于微偶联相关的激酶，双核素和类激酶样-1（以下是DCLK1），据报道是候选胃肠道干细胞标记物，并分析了正常肠道和肠道肿瘤中的作用。在2012财年，我们专注于以下实验：1。使用DCLK1-CREERT2/ROSA26R/APCMIN小鼠对肠道肿瘤进行谱系痕迹分析。他莫昔芬对去年成功生产的DCLK1-CREERT2/ROSA26R/APCMIN小鼠进行了施用（2011年），并进行了谱系跟踪分析。有趣的是，与正常的肠道不同，在他莫昔芬给药后七天，整个肠道肿瘤被蓝色细胞（即DCLK1+细胞及其后代细胞）取代。在进行他莫昔芬后一天，仅将DCLK1+细胞染成蓝色，并散布在肠道肿瘤中。随着时间的流逝，蓝色的谱系丝带逐渐由肿瘤底部的DCLK1+细胞逐渐形成，并在5-7天后几乎整个肿瘤被蓝色细胞所取代。蓝肠肿瘤一直保持完整，直到他莫昔芬可观察到的105天。这些结果表明，肠道肿瘤中的DCLK1阳性细胞是具有“自我更新能力”和“提供后代细胞”的肿瘤干细胞。 2。研究DCLK1阳性细胞对正常肠道和肠道肿瘤的消融影响。此外，为了研究靶向DCLK1阳性细胞的抗肿瘤治疗的发展，用DCLK1-CREERT2/ROSA26-LACZ/APCMIN小鼠配对了CRE诱导下表达Dibtheria毒素受体的ROSA26-IDTR小鼠，并选择性地损害了DCLK1阳性细胞。结果，它不会对正常肠道造成任何损害。只有肠道肿瘤消失或消失。基于上述结果，人们认为DCLK1是肠道肿瘤干细胞的特定标记，并且预计将来它将发展成为针对DCLK1阳性肿瘤干细胞的治疗。