膜電位イメージングから迫る、尾索類ホヤにおける心臓の収縮逆転機構

膜电位成像揭示尾索动物海鞘的心脏收缩逆转机制

• 批准号: 21657021
• 负责人: 筒井 秀和
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21657021/
• 关键词: 細胞膜; 蛍光蛋白質

脊索動物・尾索類・ホヤでは、心臓の収縮方向が規則的に逆転することが知られている。この「収縮逆転」の生理学的機構を巡る研究の歴史は100年以上にもわたるが、依然ほとんどの部分が謎のままである。本研究は、我々が近年開発してきた膜電位プローブを用いて、ホヤ心臓の膜電位の高精細時空間測定を行い、その収縮逆転機構の一端の解明を目指すものである。昨年度までに、異なる電位依存性をもつ変異体を数種類開発し、-100mVから+100mVの広い範囲を測定対象とすることに成功している。プローブ分子を心臓に適切に発現するトランスジェニックカタユウレイボヤ(Ciona intestinalis)の確立を、下田臨海実験所と共同で取り組んだ。公表されているESTの発現プロファイルを参考に、myosin regulatory light chain-5,-4,myosin heavy chaln-2,遺伝子の上流配列をそれぞれクローニングし、プロモーターとしての特性を評価した。残念ながらいずれも、光計測を行うために十分な発現を示さなかった。昨年度、同様に失敗していたEF1プロモーターの長さを変えて再度、試みたところ、優れた発現を示す事がわかった。現在、ライン樹立を試みている。このように、プロモーターの選別などでとまどってしまい、計測実験まで至っていないが、今後、ラインが得られ次第、様々なイメージング、及び、生理学実験に取り組みたい。

Chordates · chordates · ホヤで ホヤで, に inverse of the が rule of the direction of cardiac pericarp constriction 転する られて とが knowledge られて る る. Inverse planning "こ の" 収 shrinkage の physiology の を cruise る research history は 100 years に も わ た る が, still ほ と ん ど の part が mystery の ま ま で あ る. は, this study I 々 が recent open 発 し て き た membrane potential プ ロ ー ブ を with い て, ホ ヤ is crucial heart の membrane potential space to determine when の high fine line を い, そ の 収 shrinkage inverse planning agencies の end の interpret を refers す も の で あ る. Yesterday's annual ま で に, different な る potential dependency を も つ - variant を several kinds open 発 し, - 100 mv か ら + 100 mv の hiroo い van 囲 を determination as seaborne と す る こ と に successful し て い る. Crucial プ ロ ー ブ molecular を heart に appropriate に 発 now す る ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク カ タ ユ ウ レ イ ボ ヤ (Ciona intestinalis) の establishing を, cultivator, linhai be 験 と で take り group together by ん だ. Male table さ れ て い る EST の 発 now プ ロ フ ァ イ ル を reference に, myosin regulatory light chain - 5, 4, myosin heavy chaln - 2, heritage 伝 の LiuPei on sequence を そ れ ぞ れ ク ロ ー ニ ン グ し, プ ロ モ ー タ ー と し て の features を review 価 し た. Regrettably, there is a ながら ながら ずれ ずれ <e:1>, and the optical measurement を line うために is very な, resulting in a を showing さな った った った. Last year, with others in に failure し て い た EF1 プ ロ モ ー タ ー の long さ を - え て again, try み た と こ ろ, superior れ た 発 を now shown す matter が わ か っ た. Now, ラ を を set up を try みて る る. こ の よ う に, プ ロ モ ー タ ー の choose don't な ど で と ま ど っ て し ま い, measuring be 験 ま で to っ て い な い が, in the future, ラ イ ン が have ら れ time, others in 々 な イ メ ー ジ ン グ, and び, physiology be 験 に group take り み た い.

项目成果

Diffusion of Large Molecules into Assembling Nuclei Revealed Using an Optical Highlighting Technique

• DOI: 10.1016/j.bpj.2009.06.024
• 发表时间: 2009-09-02
• 期刊: BIOPHYSICAL JOURNAL
• 影响因子: 3.4
• 作者: Shimozono, Satoshi;Tsutsui, Hidekazu;Miyawaki, Atsushi
• 通讯作者: Miyawaki, Atsushi

Optical action potential screening on adult ventricular myocytes as an alternative QT-screen

成人心室肌细胞的光学动作电位筛查作为 QT 筛查的替代方法

• 发表时间: 2011
• 期刊: Cellualr Physiology and Biochemistry
• 作者: Tian Q;Oberhofer M;Ruppenthal S;Scholz A;Buschmann V;Tsutsui H;Miyawaki A;Zeug A;Lipp P;Kaestner L
• 通讯作者: Kaestner L

The E1 mechanism in photo-induced beta-elimination reactions for green-to-red conversion of fluorescent proteins.

• DOI: 10.1016/j.chembiol.2009.10.010
• 发表时间: 2009-11
• 期刊: Chemistry & biology
• 作者: H. Tsutsui;H. Shimizu;H. Mizuno;N. Nukina;T. Furuta;A. Miyawaki

FRET sensing of membrane voltage

膜电压的 FRET 传感

• 发表时间: 2009
• 作者: Tsutsui;Karasawa;Okamnra;Miyawaki;Tsutsui
• 通讯作者: Tsutsui

Visualizing voltage dynamics in zebrafish heart

斑马鱼心脏电压动态可视化

• 发表时间: 2010
• 期刊: J. Physiol.
• 作者: Tsutsui H;Higashijima S;Miyawaki A & Okamura Y
• 通讯作者: Miyawaki A & Okamura Y