权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

チューリンジェンシス菌新規細胞毒素の挑戦的分子探索

在苏云金芽孢杆菌中寻找新型细胞毒素具有挑战性的分子研究

基本信息

批准号：
21658032
负责人：
北田栄
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Kyushu Institute of Technology (2010)Kyushu University (2009)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21658032/
关键词：
バシラス菌毒素がん原虫 Bt

项目摘要

殺虫性微生物Bacillus thuringiensis (Bt菌)株から、がん細胞に作用する新しい毒素パラスポリンが発見された。本研究ではバイオメディカル資源となり得る様々なBt菌を探索し、新たな抗がんタンパク質の発見、さらに抗病原寄生虫への毒素を探しトリパノソーマなどのアフリカ大陸などに蔓延する重篤な寄生虫病の予防、治療へバイオシーズとすることを目標としている。本年度はBt菌の簡便な判別法とBt菌ライブラリーからの毒性タンパク質の効率的な抽出方法の確立を目標とした。Bt菌は栄養飢餓条件下で胞子形成とともに特異的な結晶状のタンパク凝集体を蓄積する。そこで、栄養飢餓条件下のBt菌にタンパク質結合性色素を作用させたところ、着色やコントラストから凝集体の判別が顕微鏡で容易に行えることを発見した。この方法を用いてセレウス菌群536個のコロニーの中から、これまでに比べ簡便で迅速にBt菌を検出することができ、今回、新たに14株のBt菌を発見した。また胞子形成培地の組成を検討したところ、栄養培地から胞子形成培地に変えて2、3日程度で胞子と凝集体が確認でき、これまでの方法に比べ約5倍早くBt菌の確認行うことができた。一方、約5000株のBt菌のコレクションから96の菌株を同時にハイスループットに培養し、毒素を抽出する方法を開発した。現在1000株の抗がん性スクリーニングからヒトすい臓がんに作用する数株を発見した。一方、アフリカなど熱帯地域で蔓延するトリパノソーマ感染症の対策として、抗原虫作用性のBt菌毒素活性としてパラスポリン2(PS2)を用いて解析した。この結果、PS2は血流型、唾液腺型トリパノソーマに対して比較的弱いながら毒性を示すことがわかった。

Insecticidal microorganism Bacillus thuringiensis (Bt) strain is used to produce new toxin. This study aims to explore Bt bacteria, discover new anti-parasitic substances, and detect anti-parasitic toxins, and prevent and treat parasitic diseases spreading in China. This year, a simple identification method for Bt bacteria and an extraction method for Bt toxicity were established. Bt bacteria can form spores under starvation conditions and accumulate specific crystalline aggregates. The effect of substance-binding pigment on Bt bacteria under starvation conditions is easy to be detected by microscope. This method was used to detect 536 strains of Bt bacteria, which were isolated more quickly and easily than before, and 14 strains of Bt bacteria were isolated. The method for determining the composition of the spore formation culture site is about 5 times earlier than that of the Bt culture site. A method for simultaneous culture and toxin extraction of about 5000 Bt strains was developed. At present, 1000 resistant strains have been detected. A method for the analysis of anti-protozoal activity of Bt toxin 2(PS2) is described. The results show that PS2 has a weak toxicity profile compared to blood flow and salivary gland types.