低分子量G蛋白質ARF6の細胞の形づくりへの普遍的機能関与と分子機構の解明

阐明低分子量G蛋白ARF6在细胞形成中的普遍功能参与和分子机制

• 批准号: 21659049
• 负责人: 阪上 洋行
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21659049/
• 关键词: 低分子量G蛋白質; 樹状突起; 細胞骨格; シナプス可塑性; ゴルジ装置; RNA干渉法; 細胞接着分子; 神経可塑性; シナプス; 海馬; シナプス後肥厚部

本研究では、ARF6による細胞の形づくりへの機能関与とその分子機構の解明のため、活性型ARF6遺伝子を餌にして酵母ツーハイブリット法より脳cDNAライブラリーをスクリーニングしARF6の下流効果分子の同定を試みた。その結果、JIP3(JNK-interacting protein),FIP3/4(a family of Rabll-interacting protein),GGA(Golgi-1ocalized,γadaptin ear-containing ARF-binding protein)などの既報のARF6結合蛋白質とともに、カドヘリン-カテニンと複合体を形成するミオシンVIIAの結合蛋白質であるVezatinや密着結合関連蛋白質として報告されたPilt(protein incorporated later into tight junctions)などの新規のARF6結合蛋白質候補分子の単離に成功した。そのうち、Vezatinは、in situハイブリダイゼーション法による遺伝子発現解析により、胎児期より神経系に豊富に発現し、成熟期脳では海馬に強く発現することを明らかにし、海馬初代培養系を用いた過剰発現や発現抑制実験系により樹状突起の形成に関与することを見出した。以上の所見よりARF6の下流分子として機能する可能性が強く考えられ、その成果を報告した(Neuroscience Research 2010)。また、Piltに関しては、試験管レベルでは活性型ARF6に結合すること、NIH3T3細胞やHeLa細胞のトランスゴルジ網や細胞内小胞に局在すること、また、RNA干渉法を用いた発現抑制により、ゴルジ装置の断片化が生じることを見出し、現在、Piltによるゴルジ装置の構造維持の機構に関して詳細な検討を継続している。なお、本成果の一部は平成23年3月の第116回日本解剖学会総会にて報告する予定である。

In this study, we investigated the molecular mechanism of ARF6 and ARF6 in vitro, and the molecular identity of ARF6 downstream. JIP 3 (JNK-interacting protein),FIP3/4 (a family of Rabll-interacting protein),GGA (Golgi-1 ocalized, γ adaptin ear-containing ARF-binding protein) The new ARF6 binding protein candidate molecule was successfully isolated from the pilt (protein incorporated later into tight junctions). According to the analysis of genetic changes in the situ These findings suggest that ARF 6 may function as a downstream molecule, and the results are reported (Neuroscience Research 2010). In addition, Pilt has been involved in the study of the mechanism for the structural maintenance of active ARF6 in NIH 3T3 cells, HeLa cells, and intracellular small cells using RNA stem cells. The first part of this work was published in March 2013 at the 116th meeting of the Japanese Anatomical Society.

项目成果

Surgical management of severe scoliosis with high risk pulmonary dysfunction in Duchene muscular dystrophy: patient function, quality of life and satisfaction.

杜氏肌营养不良症患者严重脊柱侧凸伴高危肺功能障碍的手术治疗：患者功能、生活质量和满意度。

• 发表时间: 2010
• 期刊: International Orthopaedics (印刷中)
• 作者: Takaso M;Nakazawa T;Imura T;Okada T;Fukushima K;Ueno M;Takahira N;Takahashi K;Yamazaki M;Ohtori S;Okamoto H;Okutomi T;Okamato M;Masaki T;Uchinuma E;Sakagami H
• 通讯作者: Sakagami H

Effect of Erythropoietin on Angiogenesis With the Increased Adhesion of Platelets to the Microvessels in the Hind-Limb Ischemia Model in Mice

• DOI: 10.1254/jphs.09262fp
• 发表时间: 2010-02-01
• 期刊: JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES
• 影响因子: 3.5
• 作者: Kato, Shintaro;Amano, Hideki;Majima, Masataka
• 通讯作者: Majima, Masataka

Ca2+/カルモデュリン依存性プロテインキナーゼIIα活性は海馬シナプス可塑性の構造学的・機能学的・行動学的発現に不可欠

Ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶 IIα 活性对于海马突触可塑性的结构、功能和行为表现至关重要

• 发表时间: 2009
• 作者: 山肩葉子、小林静香;他13名
• 通讯作者: 他13名

Fluorescent labeling of both GABAergic and glycinergic neurons in VGAT-Venus transgenic mouse

VGAT-Venus 转基因小鼠中 GABA 能和甘氨酸能神经元的荧光标记

• 发表时间: 2009
• 期刊: Neuroscience
• 影响因子: 3.3
• 作者: Wang Y.;Kakizaki T.;Sakagami H.;Saito K.;Ebihara S.;Kato M.;Hirabayashi M.;Saito Y.;Furuya N.;Yanagawa Y
• 通讯作者: Yanagawa Y

SynArfGEF is a guanine nucleotide exchage factor for Arf6 and localizes preferentially at post-synaptic specialization of inhibitory synapses.

SynArfGEF 是 Arf6 的鸟嘌呤核苷酸交换因子，优先定位于抑制性突触的突触后特化。

• 发表时间: 2011
• 期刊: Journal of Neurochemistry
• 影响因子: 4.7
• 作者: Fukaya M;Kamata A;Hara Y;Tamaki H;Katsumata O;Ito N;Takeda S;Hata Y;Suzuki T;Watanabe M;Harvey RJ;Sakagami H.
• 通讯作者: Sakagami H.