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Ca^<2+>/カルモデュリン依存性プロテインキナーゼの発現局在に関する形態学的研究

Ca^2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶表达定位的形态学研究

基本信息

批准号：
08770002
负责人：
阪上洋行
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

Ca^<2+>シグナル伝達機構に深く関与するCa^<2+>/カルモデュリン依存性プロテインキナーゼ(CaMキナーゼ)の神経細胞における分子多様性を持つ生理的意義を解明すべく、CaMキナーゼのタンパク及び遺伝子発現の局在を免疫組織化学的及びin situハイブリダイゼーション法を用いて形態学的に検討した。CaMキナーゼIVに関しては、我々は既にCaMキナーゼIVのβ亜型の一次構造と遺伝子発現局在を解明し、さらに特異的抗体の作製に成功し、本酵素が、小脳、大脳、海馬などの中脳神経系の神経細胞のみならず、上頚神経節、顎下神経節、副腎髄質細胞、三叉神経節及び脊髄神経節などの末梢神経系の神経細胞においても発現することを明らかにしてきた。本年度はさらに網膜において、本酵素が、双極神経細胞と神経節細胞に特異的に発現することを二重標識法を用いた免疫組織化学法及び遺伝子組織化学法により証明した。また、脊髄神経節における本酵素の発現神経細胞を、神経ペプチドとの関連に着目して詳細に検討した結果、GGRP陽性細胞の1/4に、また、大部分のソマトスタチン陽性細胞と共存して発現していることを明らかにし、これらの神経ペプチドとの関連が明らかにした。さらに近年、CaMキナーゼIVの活性化因子として見出されたCaMキナーゼキナーゼの遺伝子発現の分布をin situハイブリダイゼーション法を用いて検討した。その結果、CaMキナーゼキナーゼの遺伝子発現は成熟期中枢神経系において広く分布し、特に臭球、海馬と大脳皮質において強い発現が認められた。しかしながら、CaMキナーゼIVの豊富に発現している小脳での発現は微弱なものであり、また、CaMキナーゼIVの発現の認められない脳領域においてもCaMキナーゼキナーゼの発現が認められることより、CaMキナーゼキナーゼがCaMキナーゼIVの活性化調節以外の機能に関与することやサブタイプが存在する可能性が示唆された。以上、申請した実験計画に従い、CaMキナーゼの分子多様性の神経細胞における生理的意義を形態学的に着実に追及しつつある。

The physiological significance of molecular diversity in the neurocellular structure of Ca^2+>-Ca^2+>-Ca ^2 +^2 +^->-Ca ^2 +^->-Ca ^2 +^->-Ca ^2 +^+^ CaM IV is related to the development of primary structure and protein of CaM IV β-type. The enzyme has been successfully developed in the production of specific antibodies to CaM IV β-type. The enzyme has been successfully developed in the production of central nervous system neurons, superior cerebral ganglion, inferior mandibular ganglion, pararenal cytoplasmic cells, hippocampus, hippocampus The nerve cells of the trigeminal nerve system and the spinal nerve system are present in the brain. This year, the expression of this enzyme in the retina, bipolar neurons and ganglion cells was demonstrated by double labeling and immunohistochemical methods. The results of detailed analysis showed that 1/4 of GGRP positive cells, most of GGRP positive cells, were found in the middle of the brain, and the relationship between GGRP positive cells and GGRP positive cells was found in the middle of the brain. In recent years, the activation factor of CaM protein IV has been found in the distribution of CaM protein in situ. As a result, CaM gene expression was found in the central nervous system during maturity, especially in the hippocampus and cortex. The occurrence of CaM IV is weak, and the occurrence of CaM IV is weak. The occurrence of CaM IV is recognized in the middle of the field. The occurrence of CaM IV is recognized in the middle of the field. The occurrence of CaM IV is related to the function other than the activation regulation of CaM IV. The occurrence of CaM IV is possible. In the above, the application for the implementation of the project, CaM, molecular diversity of neurons, physiological significance, morphological implementation and implementation