コッホの原則を満たす実験的マウス潰瘍性大腸炎起炎菌の同定

满足科赫原理的实验性小鼠溃疡性结肠炎致病细菌的鉴定

• 批准号: 21659110
• 负责人: 杉山 剛志
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Gifu Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21659110/
• 关键词: 感染免疫

潰瘍性大腸炎(Ulcerative colitis、以下UC)は、病因が不明の慢性炎症を特徴とする腸疾患である。病因として腸内細菌叢の関与が古くから疑われているが、関与する菌種、発症機構については未だ明らかではない。我々はヒトUCと酷似した病態を示すデキストラン硫酸ナトリウム(Dextran Sulfate Sodium : DSS)誘発マウスUCモデルにおいて、抗菌薬投与により発症が抑制され、さらにこのマウスに対し正常マウス糞便により腸内細菌叢を再構築することで再び発症するという実験系を確立した。本研究ではこれらのマウスの腸内細菌叢をT-RFLP解析に加えて定量PCR法を用い、T-RFLP解析では検出できない非主要細菌叢の変化を解析した。抗菌薬投与により糞便中のAtopobium群、Bacteroides群、Bfidobacterium群、Lactobacilus群が顕著に減少することが明らかになった。それに対し、主要な菌群であるClostridium coccoides群はほとんど変化せず、相対的にC. coccoides群は抗菌薬投与後に80%以上を占める最優位菌群となることがわかった。しかし、再発症する腸内細菌叢再構築マウスでは抗菌薬投与マウスに比べて明らかな菌叢の変化はみられなかった。従って、本モデルで再発症に関与する菌叢の変化は糞便中には検出されないと考えられた。そこで、結腸粘膜に存在する細菌叢について同様に比較したところ、Clostridium属細菌の変化が顕著であり、抗菌薬投与により減少し、再構築マウスで再び増加していることがわかった。さらに、T-RFLP解析により同菌に相当するフラグメントを同定した。この結果をもとに本菌を再構築に用いた菌液中の細菌から単離し、同菌による腸内細菌叢の再構築を行うことによりUC起炎菌として必要十分であるかを検討する必要がある。

Ulcerative colitis (UC) is a chronic inflammation of unknown etiology characterized by intestinal disorders. Pathogenic factors: intestinal bacterial flora, bacteria species, pathogenic mechanisms We have established a system for inhibiting and reestablishing intestinal bacterial flora in the presence of UC-like pathogens such as Dextran Sulfate Sodium (DSS), antimicrobial agents, and other pathogens. In this study, T-RFLP analysis was used to detect and analyze non-major bacterial flora. Atopodium group, Bacteroides group, Bfidobacterium group and Lactobacilus group in feces were reduced. C. coccoides, C. coccoides Coccoides group accounted for more than 80% of the optimal bacterial group after the antibacterial agent was injected. The intestinal bacterial flora reconstructs itself in response to the presence of antimicrobial agents. The bacteria in the faeces are detected in the faeces. In addition, the bacterial flora in the colon mucosa is similar to that in the colon mucosa, and the bacteria belonging to Clostridium are transformed into bacteria, and the antibacterial agent is injected into the colon mucosa. T-RFLP analysis was performed on the same strain. As a result, the bacteria in the bacterial solution were isolated and the intestinal bacterial flora was reconstructed.