自己間葉系幹細胞由来細胞シート移植による自己組織化心筋再生治療法の開発

点击翻译按钮获取中文摘要

1.ヒト脂肪間葉系幹細胞よりの心筋細胞への分化誘導ヒトの皮下脂肪より間葉系幹細胞を採取し、培養系を確立した、脂肪間葉系幹細胞よりデキサメサゾンを用いて、心筋細胞への分化誘導を行った。心筋骨格蛋白(Caridiac actin等)、転写因子(GATA4,Nkx2.5等)を発現することが判明した。この細胞を免疫不全ラットの慢性期梗塞モデルに移植したところ、心機能は向上し、移植した細胞は心筋特有の構造蛋白(Troponin T等)発現していた。2.骨格筋筋芽細胞と脂肪由来間葉系幹細胞の共培養骨格筋筋芽細胞と脂肪間葉系幹細胞を共培養し、培養上清を採取し、様々な血管新生因子(HGF、VEGF等)をEHSAにて測定したところ、単独の細胞培養上清よりも細胞を混合した上清にて、血管新生因子の発現は高かった。筋芽細胞:脂肪由来間葉系幹細胞=4:1の混合比で混合した時、もっとも血管新生因子の発現が高かった。3.骨格筋筋芽細胞と脂肪由来間葉系幹細胞の共培養細胞シートの作成とラット慢性期心筋梗塞モデルへの移植筋芽細胞と間葉系幹細胞を混合した細胞シートを作成し、ラット慢性期心筋梗塞モデルへ移植した。単独細胞より作成した細胞シートより混合細胞シートは心機能の向上効果は有意に高く、血管新生効果、左室のreverse remodeling効果は高度であった。4.骨格筋筋芽細胞と脂肪由来間葉系幹細胞の共培養細胞シートの慢性期ブタ梗塞モデルへの移植ブタ慢性期梗塞モデルへ混合細胞シートを移植した。混合細胞シートにおいて、単独細胞シートと比較して、有意に心筋再生効果が高かった。5.ヒト脂肪間葉系幹細胞由来心筋芽細胞シートのブタ慢性期梗塞モデルへの移植デキサメサゾンにて分化誘導したヒト脂肪間葉系幹細胞由来心筋芽細胞シートを慢性期ブタ梗塞モデルへ移植した。本細胞シートを移植することにより、心機能は有意に向上し、特に移植した部位の局所収縮能の向上は有意に向上した。心筋電極マッピングにて、ホスト心筋よりの梗塞部位への電気伝導性を評価したところ、梗塞部位での電気伝搬能は向上し、移植した心筋芽細胞はホスト心筋と電気的に結合していることが示唆された。