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口腔細菌のバイオフィルム形成因子の発現は唾液タンパク質によって制御されるか?

口腔细菌中生物膜形成因子的表达是否受唾液蛋白调节？

基本信息

批准号：
21659488
负责人：
於保孝彦
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Kagoshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21659488/
关键词：
歯学微生物唾液歯垢

项目摘要

本研究の目的は口腔疾患のみならず様々な全身疾患を誘発することが知られている口腔バイオフィルムの形成に際して、唾液タンパク質がどのように関わるかを調べるものである。本年度はStreptococcus mutansの口腔バイオフィルム形成因子の遺伝子発現に及ぼす唾液の影響を調べた。S.mutans Xcを培養してリン酸緩衝液(PBS)で洗浄した後、ヒト安静時唾液を遠心分離して得られた上清中に懸濁し、37℃で1時間培養した。菌体を回収した後RNAを抽出し、バイオフィルム形成因子である菌体表層タンパク質抗原(PAc)およびグルカン合成酵素(GTF)の遺伝子発現をリアルタイムPCR法で調べた。その結果、唾液と反応させた菌体のPAc遺伝子発現は、対照(PBS処理)と比較して2.0倍に上昇し、一方GTF遺伝子発現は、0.1倍に低下した。菌体と唾液との反応時間を変化させた場合、顕著な差は認められなかった。また他のS.mutans株(MT8148、UA159)を用いたところ、発現の程度に差はあるもののPAc遺伝子発現の上昇、GTF遺伝子発現の低下が同様に認められた。次にS.mutansのPAcとGTFのタンパク発現レベルを経時的に調べたところ、PAcの発現はほぼ一定であるのに対して、GTFの発現は時間とともに低下した。以上の結果からPAcは唾液タンパク質と反応する因子であるため、唾液の存在によりその遺伝子発現が上昇する何らかの作用が働くこと、GTFはグルコースの存在下に活性が発現される酵素であるため唾液は影響を及ぼさないことが推測された。PAc遺伝子発現の上昇をもたらす唾液中のタンパク質を同定するため、唾液の分画を行い菌体への作用を確認中であるが、このタンパク質の機能領域を決定することにより口腔バイオフィルムの形成抑制が可能である。

The purpose of this study is to investigate the development of oral diseases, oral diseases, and systemic diseases. In this year's Streptococcus mutans, the oral cavity will be affected by the formation factor and saliva will be detected. After washing with acid solution (PBS) in S.mutans Xc, the saliva was separated when it was quiet, and the supernatant was incubated at 37 ℃ for 1 time. After the return of the bacteria, RNA was extracted, and the formation factor was detected by PCR method. The bacterial surface antigen (PAc) was detected by enzyme synthesis enzyme (GTF). The results showed that the results of saliva reflex test showed that the number of PAc cells in saliva was significantly higher than that in GTF cells, and that in saliva was significantly lower than that in GTF cells (P < 0.01). Bacteriological saliva assay was used to analyze the combination of bacteria, saliva, saliva and saliva. Other S.mutans strains (MT8148, UA159) were detected in the same way as those in other strains (MT8148, UA159). The results showed that there was no difference in the degree of detection. During the second S.mutans, PAc, GTF, PAc, PAc, and GTF, you will need to make sure that you are in a bad situation, and that your time is low. The above results showed that PAc saliva, saliva and saliva. In the PAc test, we can see that the saliva has the same effect as that in the saliva, and that the bacteria in the saliva are in the process of confirming the effect of bacteria. In the field of the machine, it is possible to determine the formation of inhibition in the oral cavity.