Cellular and molecular study on live imaging of expression of sperm functional proteins and its relation to infertility

精子功能蛋白表达活体成像及其与不孕不育关系的细胞分子研究

• 批准号: 22390033
• 负责人: TOSHIMORI Kiyotaka
• 金额: $ 12.31万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22390033/
• 关键词: 精子; 受精; エクアトリン; ライブセルイメージング; 遺伝子改変マウス; Equatorin; 不妊症; 先体反応; 精子形成; 胚発生; 不妊; 受精卵; Izumo; CD9; 卵活性; 卵子

We have established Eqtn-EGFP-TG mouse and ODF2-EGFP-TG mouse lines, and tried to take live-image of the molecular change from the acrosome reaction throughout to egg activation. A whole cell imaging (80-100nm acrosomal membrane complex) of Eqtn-EGFP-TG sperm was obtained by new microscopy STED system without sectioning, which suggested a possibility of live cell imaging during fertilization. Galnt3 transferase is required for O-glycosylation of carbohydrate chain branching from threonine 138 of equatorin molecule. We clarified the distribution abnormality of egg activation related MN13 molecule in the infertile patient who have round-head sperm (globozoospermia), by comparing the expression with that of the model mouse GOPC-/- spermatozoa. Based on these analyses, we proposed the mechanism leading to egg activation failure in human sperm.

我们建立了Eqtn-EGFP-TG小鼠和ODF 2-EGFP-TG小鼠系，并尝试拍摄从顶体反应到卵子激活的分子变化的实时图像。Eqtn-EGFP-TG精子的全细胞成像（80- 100 nm顶体膜复合物）在显微镜STED系统上不经切片获得，提示了受精过程中活细胞成像的可能性。Galnt 3转移酶是赤道蛋白分子中从苏氨酸138分支的糖链的O-糖基化所必需的。我们通过与模型小鼠GOPC-/-精子的表达进行比较，阐明了卵子激活相关MN 13分子在圆头精子（球形精子症）不育患者中的分布异常。在此基础上，我们提出了导致人类精子卵子激活失败的机制。

项目成果

Tysnd1 deficiency interferes with mouse peroxisomal functions

Tysnd1 缺陷会干扰小鼠过氧化物酶体功能

• 发表时间: 2011
• 作者: Mizuno Y;Ninomiya Y;Iseki M;Iwasa H;Akita M;Tsukui T;Ito C;Toshimori K,Shimozawa N;Nishimukai M;Hara H;MaebaR;Okazaki T;Horai Y;Watanabe M;Motegi H;Wakana S;Noda T;Kurochkin Igor V;Mizuno Y;Schoenbach C;Okazaki Y.
• 通讯作者: Okazaki Y.

(1)新しい検査法に基づく精子の機能診断法、選別保存法の開発と生殖医療応用2012年4月11日産経新聞(2)報道関連情報

(1) 基于新检测方法和生殖医学应用的精子功能诊断方法和选择保存方法的开发 2012 年 4 月 11 日产经新闻 (2) 新闻相关信息

ホームページ 業績

主页成就

抗perinuclearthecaMN13抗体を使った新しい精子評価法

使用抗核周卵泡膜MN13抗体的新精子评估方法

• 发表时间: 2012
• 作者: 伊藤千鶴;大和屋健二;兼子智;年森清隆
• 通讯作者: 年森清隆

Sperm Preparation精子のDNA fragmentation

精子制备精子 DNA 片段化

• 发表时间: 2011
• 作者: 年森清隆