Effective induction of inner ear hair cells from mouse embryonic stem cells

小鼠胚胎干细胞有效诱导内耳毛细胞

基本信息

  • 批准号:
    22390318
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 11.98万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
  • 财政年份:
    2010
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2010 至 2012
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

Hearing loss is mainly caused by loss of sensory hair cells (HCs) in the organ of Corti or cochlea. Although embryonic stem (ES) cells are a promising source for cell therapy, little is known about the efficient generation of HC-like cells from ES cells. In the present study, we developed a single-medium culture method for growing embryoid bodies (EBs), in which conditioned medium (CM) from cultures of ST2 stromal cells (ST2-CM) was used for 14-day cultures of 4-day EBs. At the end of the 14-day cultures, up to 20% of the cells in EB outgrowths expressed HC-related markers, including Math1 (also known as Atoh1), myosin6, myosin7a, calretinin, α9AchR and Brn3c (also known as Pou4f3), and also showed formation of stereocilia-like structures. Further, we found that these cells were incorporated into the developing inner ear after transplantation into chick embryos. The present inner ear HC induction method using ST2-CM (HIST2 method) is quite simple and highly efficient to obtain ES-derived HC-like cells with a relatively short cultivation time.
听力损失主要是由Corti器或耳蜗中的感觉毛细胞(HC)的损失引起的。虽然胚胎干细胞(ES)是一种有前途的细胞治疗来源,但很少有人知道从ES细胞有效产生HC样细胞。在本研究中,我们开发了一种用于生长胚状体(EBs)的单一培养基培养方法,其中来自ST 2基质细胞(ST 2-CM)培养物的条件培养基(CM)用于4天EBs的14天培养物。在14天的培养结束时,EB副产物中高达20%的细胞表达HC相关标志物,包括Math 1(也称为Atoh 1),肌球蛋白6,肌球蛋白7a,钙视网膜蛋白,α 9 AchR和Brn 3c(也称为Pou 4f 3),并且还显示出静纤毛样结构的形成。此外,我们发现这些细胞在移植到鸡胚后被纳入发育中的内耳。本发明的使用ST 2-CM的内耳HC诱导方法(HIST 2方法)非常简单且高效地以相对短的培养时间获得ES来源的HC样细胞。

项目成果

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In vitro differentiation of mouse embryonic stem cells into inner ear hair cell-like cells using stromal cells
使用基质细胞将小鼠胚胎干细胞体外分化为内耳毛细胞样细胞
  • DOI:
  • 发表时间:
    2012
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Yukiteru Ouji;Shigeaki Ishizaka;Fukumi Nakamura-Uchiyama;Akio Wanaka;Masahide Yoshikawa
  • 通讯作者:
    Masahide Yoshikawa
ES細胞から内耳有毛細胞への効率的分化誘導法の開発
开发ES细胞向内耳毛细胞高效分化诱导方法
  • DOI:
  • 发表时间:
    2012
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    王寺幸輝;吉川正英
  • 通讯作者:
    吉川正英
Carnitine-induced senescence in glioblastoma cells.
肉碱诱导胶质母细胞瘤细胞衰老。
  • DOI:
    10.3892/etm.2012.556
  • 发表时间:
    2012
  • 期刊:
  • 影响因子:
    2.7
  • 作者:
    S. Yamada;R. Matsuda;F. Nishimura;I. Nakagawa;Y. Motoyama;Young;Mitsutoshi Nakamura;H. Nakase;Y. Ouji;M. Yoshikawa
  • 通讯作者:
    M. Yoshikawa
Efficient induction of inner ear hair cell-like cells from Math1-transfected mouse ES cells
从 Math1 转染的小鼠 ES 细胞中有效诱导内耳毛细胞样细胞
  • DOI:
  • 发表时间:
    2013
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Yukiteru Ouji;Shigeaki Ishizaka;Fukumi Nakamura-Uchiyama;Akio Wanaka;Masahide Yoshikawa
  • 通讯作者:
    Masahide Yoshikawa
Induction of inner ear hair cell-like cells from Math1-transfected mouse ES cells.
  • DOI:
    10.1038/cddis.2013.230
  • 发表时间:
    2013-07-04
  • 期刊:
  • 影响因子:
    9
  • 作者:
  • 通讯作者:
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知道了