Die Organisation und Regulation der Endreplikationsmaschinerie in spirotrichen Ciliaten

螺毛纤毛虫末端复制机制的组织和调节

基本信息

项目摘要

In diesem Projekt soll die Organisation und damit auch die Regulation der Endreplikationsmaschinerie im Makronukleus spirotricher Ciliaten untersucht werden und die biologische Funktion der einzelnen Komponenten durch Expressionshemmung untersucht werden. In diesem System sind fünf mögliche Interaktionspartner bekannt, von denen Telomere, das Telomer-bindende Protein (TeBP), Telomerase und das Telomerase-assoziierte Protein p43 molekular gut charakterisiert sind. Komponenten der nuklearen Matrix, die mit diesen Komponenten interagieren sollen in diesem Projekt identifiziert werden. Zunächst wird festgestellt, welche der verschiedenen Komponenten der Endreplikationsmaschinerie mit subnuklearen Strukturen interagieren und wie ihr Verhalten während der Replikation ist. Daran schließt sich die Frage nach der biologischen Bedeutung dieser Komponenten auf Kernstruktur, Stabilisierung von Telomersequenzen und der G-Quadruplexstruktur von Telomersequenzen, Kernlokalisation und Kernretention an. Diese Fragestellungen sollen durch gezielte Expressionshemmung der verschiedenen Komponenten durch RNAi beantwortet werden. Schließlich sollen noch die Proteine der nuklearen Matrix charakterisiert werden, die für die Assoziation der Telomere an die Kernmatrix verantwortlich sind. Alle Untersuchungen werden in enger Zusammenarbeit mit T. Cech (Boulder, Washington) durchgeführt werden, in dessen Labor die biochemische Charakterisierung der Komponenten der Endreplikationsmaschinerie weit fortgeschritten ist.
在本项目中,我们还研究了呼吸纤毛韦尔登的组织和结构调节以及表达韦尔登的生物学功能。在该系统中,存在着多种相互作用的伙伴,包括端粒、端粒结合蛋白(TeBP)、端粒酶和端粒酶相关蛋白p43。核学习矩阵的组成部分,它与韦尔登项目识别中所需的组成部分相互作用。Zunächst wird festgestellt,welche der verzenedenen Komponenten der Endreplikationsmaschinerie mit subnuklearen Strukturen interagieren und wie ihr Verhalten während der diation ist.在生物学基础上,提出了一种新的方法,即在核结构上进行组合,在端粒序列上进行稳定,在端粒序列上进行G-四重结构,核定位和核保持。这些片段通过RNA干扰大豆韦尔登的基因表达来解决。因此,我们还需要了解具有核基质特性的蛋白质韦尔登,从而使端粒与核基质结合。所有这些韦尔登都是通过T.切赫(博尔德,华盛顿)在韦尔登(Boulder),在dessen Labor中表现出Endreplikationsmaschinerie的成分的生物化学特征(Biochemische Charakterisierung der Komponenten der Endreplikationsmaschinerie weit fortgeschritten ist)。

项目成果

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