造血幹細胞分化転換における細胞リプログラミング機構の解明

阐明造血干细胞转分化中的细胞重编程机制

• 批准号: 11J05657
• 负责人: 毛利 友美
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11J05657/
• 关键词: 造血幹細胞; microvesicle

組織幹細胞や骨髄由来細胞、造血幹細胞を移植することで、移植細胞が体細胞に分化転換し、組織の修復・再生に寄与することが示され、これらの細胞の組織再生能を利用した疾患治療法が確立されつつある。しかしながら、実際には、移植細胞が分化転換するとともに、移植細胞と体細胞との細胞融合が観察されており、移植細胞の細胞動態に関しては依然として不明な点が多い。生体内における生理的細胞リプログラミング機構の意義を明らかにすることを目的として、組織障害に応答した細胞リプログラミング機構に関して、microvesicleによる制御に着目し、以下の解析を行った。組織障害マウスモデルとして四塩化炭素投与による急性肝障害モデル、あるいは、ドキソルビシン投与による心筋障害モデルを用いた。組織障害モデルマウスより採取・ソーティングした骨髄細胞や骨髄由来造血幹細胞において、microvesicleが発現していることを電子顕微鏡観察にて確認した。Microvesicleは細胞膜からsheddingにより形成され、mRNAやmiRNA等の種々の細胞質内分子を豊富に含有しているとことが報告されている。そこで、超遠心法にて回収した骨髄細胞由来microvesicle内において、RNA及びタンパク質が含まれているかどうかを検討したところ、RNA及びタンパク質の含有が認められた。次に、組織障害誘発により、骨髄細胞由来microvesicle内において発現上昇するようなmRNAの同定を試みた。組織障害モデルマウスあるいはコントロールマウスから得られた骨髄細胞由来microvesicleにおける細胞リプログラミング制御因子等のmRNA発現に関してqRT-PCR法により解析したが、有意な差を示すような因子を同定することはできなかった。組織障害モデルマウスの骨髄細胞由来microvesicle内に特異的に発現しているmRNA及びmiRNA等を同定するためには、マイクロアレイ等の網羅的な解析を行う必要があると考えられる。

Tissue stem cells, bone derived cells, hematopoietic stem cells transplantation, transplantation, somatic cell differentiation, tissue repair, regeneration, tissue regeneration, and utilization of the cell tissue regeneration energy have been established for disease treatment. In fact, there are still many unknown points about the differentiation and exchange of transplanted cells, the observation of cell fusion of transplanted cells and somatic cells, and the dynamics of transplanted cells. The significance of physiological cell proliferation mechanism in vivo is clarified, and the purpose and control of tissue damage are discussed below. The tissue damage is caused by carbon poisoning. The tissue damage is caused by carbon poisoning. Tissue damage was identified by electron microscopy, including bone marrow cells and hematopoietic stem cells. Microvesicles are rich in cytoplasmic molecules such as shed protein, mRNA and miRNA. In addition, the gene expression of RNA and RNA in the microvesicle was also studied. In addition, tissue damage induction, bone marrow cells from the microvesicle in the production of increased mRNA and protein synchronization test The expression of mRNA in the tissue barrier cells derived from microvesicles was analyzed by qRT-PCR, and the expression of mRNA in the control factors was determined by PCR. The expression of mRNA and miRNA in bone cells derived from microvesicles is determined by the analysis of mRNA and miRNA in bone cells.