ユビキチンが司る新規ＮＦ－κＢ活性化機構のＢ細胞の分化・成熟　における役割

I.SHARPINコンディショナルノックアウトマウスの作製代表研究者は、Cre-LoxPシステムを用いた遺伝子ターゲッティング法により、SHARPINコンディショナルノックアウトマウスの作製に成功した。II.B細胞の成熟、機能におけるHOIP、HOIL-1L、SHARPINの役割の解明SHARPINコンディショナルノックアウトマウスの作製により、代表研究者の受入研究室は、すでに樹立されていたHOIP、HOIL-1Lを含め、LUBACユビキチンリガーゼ複合体の構成分子全てのコンディショナルノックアウトマウスを所有することとなった。これらコンディショナルノックアウトマウスをmb1-Creマウスと交配することにより、B細胞特異的HOIP、HOIL-1L、SHARPIN欠損マウスを作製し、B細胞の成熟、機能におけるLUBACおよびその構成分子の役割を解明することを本研究の目的とした。解析にあたっては、LUBACの直鎖状ポリユビキチン鎖形成における活性中心であるHOIPをB細胞特異的に欠損したマウスを優先することとした。その結果、HOIPはB細胞の成熟、機能において極めて重要な役割を果たしていることが明らかとなった。B細胞特異的HOIPノックアウトマウスでは、B1細胞と呼ばれるB細胞集団が特異的に欠損しており、さらには抗原に対する抗体反応が完全に欠損していることが示された。解析を進めた結果、HOIP欠損B細胞はB細胞受容体依存的なシグナル活性化は正常である一方、CD40およびTACI依存的な古典的NF-κB活性化およびERK活性化が減弱していることを見出した。B細胞特異的HOIL-1L、SHARPIN欠損マウスについては、現在、交配を進めており、マウスが得られ次第解析を開始する予定である。

I.SHARPINコンディショナルノックアウトマウスの作製代表研究者は、Cre-LoxPシステムを用いた遺伝子ターゲッティング法により、SHARPINコンディショナルノックアウトマウスの作製に成功した。II.B細胞の成熟、機能におけるHOIP、HOIL-1L、SHARPINの役割の解明SHARPINコンディショナルノックアウトマウスの作製により、代表研究者の受入研究室は、すでに樹立されていたHOIP、HOIL-1Lを含め、LUBACユビキチンリガーゼ複合体の構成分子全てのコンディショナルノックアウトマウスを所有することとなった。これらコンディショナルノックアウトマウスをmb1-Creマウスと交配することにより、B細胞特異的HOIP、HOIL-1L、SHARPIN欠損マウスを作製し、B細胞の成熟、機能におけるLUBACおよびその構成分子の役割を解明することを本研究の目的とした。解析にあたっては、LUBACの直鎖状ポリユビキチン鎖形成における活性中心であるHOIPをB細胞特異的に欠損したマウスを優先することとした。その結果、HOIPはB細胞の成熟、機能において極めて重要な役割を果たしていることが明らかとなった。B細胞特異的HOIPノックアウトマウスでは、B1細胞と呼ばれるB細胞集団が特異的に欠損しており、さらには抗原に対する抗体反応が完全に欠損していることが示された。解析を進めた結果、HOIP欠損B細胞はB細胞受容体依存的なシグナル活性化は正常である一方、CD40およびTACI依存的な古典的NF-κB活性化およびERK活性化が減弱していることを見出した。B細胞特異的HOIL-1L、SHARPIN欠損マウスについては、現在、交配を進めており、マウスが得られ次第解析を開始する予定である。