Application of convenience gender-sorting of mouse spermatozoa to mouse reproductive engineering technology

小鼠精子便捷性别分选在小鼠生殖工程技术中的应用

• 批准号: 22650095
• 负责人: HASHIMOTO Haruo
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: 実験動物中央研究所 (2011)Central Institute for Experimental Animals (2010)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22650095/
• 关键词: 動物実験技術; 体外受精; 胚移植; 雌雄生み分け; マウス; 雌雄産み分け; SRY; 雌雄生みわけ; Sry遺伝子

In this study, we attempted to apply convenience gender sorting methods for the mammals to mice with Cy3 labeling for intracytoplasmic sperm injection(ICSI) and magnetic beads for in vitro fertilization(IVF), via sex-determining region Y(SRY) antibody.The Cy3-SRY antibody conjugate was added to TYH medium suspended mouse spermatozoa. The mouse spermatozoa labeled with Cy3-SRY antibody conjugate were used to ICSI. On the other hand, after reaction of the SRY antibody and mouse spermatozoa in TYH medium, magnetic beads were added and incubated. Thereafter, the conjugates of spermatozoa, SRY antibody and magnetic beads were pulled to the bottom of the medium by a magnet and the supernatant in the medium was used for IVF. The embryos were transferred to pseudo-pregnant mice, and the gender ratio was investigated on day 18 of gestation by Cesarean section.As these results, the ICSI using the spermatozoa with Cy3-SRY antibody conjugate succeeded to reproduce 31 males of 36 infants(86.1%). On the other hand, the female proportion reproduced by the IVF using the spermatozoa with conjugates of SRY antibody and magnetic beads was 67.3%.It was considered that these methods are very effective in reproduction of transgenic mice with more than 2 mutation genes that require several times of IVF and ET.

在本研究中，我们尝试通过性别决定区Y（SRY）抗体将Cy3标记用于胞浆内单精子注射（ICSI）和磁珠用于体外受精（IVF）的小鼠应用于哺乳动物的方便性别分类方法。将Cy3-SRY抗体偶联物加入TYH培养基悬浮小鼠精子中。用Cy3-SRY抗体偶联物标记小鼠精子进行ICSI。另一方面，将SRY抗体与小鼠精子在TYH培养基中反应后，加入磁珠孵育。然后用磁铁将精子、SRY抗体和磁珠的结合物拉至培养基底部，培养基中的上清用于体外受精。将胚胎移植到假妊娠小鼠体内，于妊娠第18天剖宫产观察性别比例。结果表明，使用Cy3-SRY抗体偶联的精子进行ICSI，成功生育31名男婴36名（86.1%）。另一方面，使用SRY抗体与磁珠结合的精子体外受精繁殖的雌性比例为67.3%。认为这些方法对于2个以上突变基因的转基因小鼠繁殖非常有效，需要多次IVF和ET。

项目成果

糖尿病のトランスレーショナル研究支援のためのIRS・2ノックアウトマウスの系統化と特性検索に関する研究

IRS-2 敲除小鼠的品系和特征研究以支持糖尿病转化研究

• 发表时间: 2010
• 作者: 橋本晴夫;江袋進;野津量子;植野昌未;新井敏郎;川井健司;平田裕;小川麻耶;水澤卓馬;末水洋志;伊藤守;齊藤宗雄;日置恭司(実中研,日獣大);橋本晴夫;橋本晴夫
• 通讯作者: 橋本晴夫

Study on establishment of congenic strains and screening of characteristics in IRS-2 deficient mice to support translational research on type 2 diabetes

IRS-2缺陷小鼠同源品系的建立和特征筛选研究支持2型糖尿病的转化研究

• 发表时间: 2011
• 期刊: Experimental Animal
• 作者: 三ッ石英生;加藤たか子;加藤幸雄;Haruo Hashimoto
• 通讯作者: Haruo Hashimoto

db/dbマウスの系統比較から考察されるレジスチンの役割

从db/db小鼠品系的比较看出抵抗素的作用

• 发表时间: 2011
• 期刊: 実験動物技術
• 作者: 橋本晴夫;新井敏郎;川井健司;鬼頭千佳;大美典子;早川絵里;水島友子;樋口裕一郎;江袋美知;末水洋志;日置恭司;斎藤宗雄;伊藤守;小坂樹徳
• 通讯作者: 小坂樹徳

アイソレーター飼育はC57BL/6JJclマウスにインシュリン抵抗性を引き起こす

隔离器外壳导致 C57BL/6JJcl 小鼠胰岛素抵抗

• 发表时间: 2011
• 作者: 橋本晴夫;江袋進;野津量子;植野昌未;新井敏郎;川井健司;平田裕;小川麻耶;水澤卓馬;末水洋志;伊藤守;齊藤宗雄;日置恭司(実中研,日獣大)
• 通讯作者: 日置恭司(実中研,日獣大)

Role of resistin inferred from strain difference in B6J- and BKS.Cg-db/db mice

从 B6J- 和 BKS.Cg-db/db 小鼠品系差异推断抵抗素的作用

• 发表时间: 2011
• 期刊: Journal of Experimental Animal Technology
• 作者: Haruo Hashimoto;et al
• 通讯作者: et al