Analysis of translesion synthesis past UV-induced DNA lesion 6-4 photoproduct in mammalian cells

哺乳动物细胞中紫外线诱导 DNA 损伤 6-4 光产物的跨损伤合成分析

• 批准号: 22710059
• 负责人: AKAGI Jun-ichi
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: National Institute of Health Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22710059/
• 关键词: DNA複製・修復; 損傷乗り越え複製; ミスマッチ修復; 突然変異; 紫外線; 癌; 損傷乗り越えDNA複製; DNA損傷; 6-4光産物; DNAポリメラーゼ・ゼータ

本研究では紫外線により誘発されるDNA損傷の一つである6-4光産物（6-4PP）の損傷乗り越え複製（TLS）機構と、それに伴う突然変異誘発の分子機構の解析を目的として、さまざまなTLSポリメラーゼ欠損細胞を用いて細胞内TLSアッセイを行った。その結果、主要なTLSポリメラーゼであるPolη（イータ）、Polι（イオタ）、Polκ（カッパ）をすべて欠損した細胞でも6-4PPに対するTLS活性がみられ、細胞内ではこれらのTLSポリメラーゼ以外に複製ポリメラーゼ等が6-4PPのTLSに関わっている可能性が示唆された。一方でPolζ（ゼータ）の活性サブユニットであるRev3欠損細胞ではTLS活性が消失することから、Polζが6-4PPのTLSを完了するために必須のextenderであることが示された。そこで Polζによる突然変異誘発メカニズムについてさまざまな配列中の6-4PPを用いて解析したところ、Polζは損傷の次の塩基に対して高い頻度で突然変異を引き起こすこと、およびその変異頻度はDNA損傷前後の塩基配列の影響を大きく受けることが明らかとなった。

This study で は ultraviolet に よ り 発 lure さ れ る DNA damage の a つ で あ る 6 (pp) 6-4-4 light products の damage 乗 り more え copy (TLS) institutions と, そ れ に with う suddenly - different induced 発 の molecular institutions の parsing を purpose と し て, さ ま ざ ま な TLS ポ リ メ ラ ー ゼ owe damaged cells を using い て in cells TLS ア ッ セ イ を line っ た . そ の results, main な TLS ポ リ メ ラ ー ゼ で あ る Pol eta (イ ー タ), Pol ι (イ オ タ), Pol κ (カ ッ パ) を す べ て owe loss し た cells で も 6-4 pp に す seaborne る TLS active が み ら れ, intracellular で は こ れ ら の TLS ポ リ メ ラ ー ゼ outside に copy ポ リ メ ラ ー ゼ が such as 6-4 pp の TLS Youdaoplaceholder0 related to わって る る possibility が indicates された. One party で Pol zeta (ゼ ー タ) の active サ ブ ユ ニ ッ ト で あ る Rev3 owe damaged cells で は が TLS disappeared す る こ と か ら, Pol zeta が 6-4 pp の TLS を finished す る た め に must の extender で あ る こ と が shown さ れ た. Youdaoplaceholder0 で Pol zeta に よ る suddenly - different induced 発 メ カ ニ ズ ム に つ い て さ ま ざ ま な match column の 6-4 pp を with い て parsing し た と こ ろ, Pol zeta の は injury time の salt base に し seaborne て い high frequency suddenly で - different を lead き up こ す こ と, お よ び そ の - different frequency before and after DNA damage は の salt base with column の を affected き く by け る こ と が Ming ら か Youdaoplaceholder0.

项目成果

Translesion DNA polymerase Polk acts an alternative TLS polymerase upon UV-induced DNA lesion in mouse cells

跨损伤 DNA 聚合酶 Polk 在小鼠细胞中对紫外线诱导的 DNA 损伤起到替代 TLS 聚合酶的作用

• 发表时间: 2010
• 作者: Jun-ichi Akagi;Kenji Suzuki;E iji Ohashi;Haruo Ohmori;Fumio Hanaoka
• 通讯作者: Fumio Hanaoka

PolκのRev1に依存した活性が紫外線によるDNA損傷のTLSに関与する

Rev1 依赖性 Polκ 活性参与 UV 诱导 DNA 损伤的 TLS

• 发表时间: 2012
• 作者: 鈴木 健司;赤木 純一;大橋 英治;横井 雅幸;大森 治夫;花岡 文雄
• 通讯作者: 花岡 文雄