The study on molecular functions of the novel RNAi factors DRH-3 and E1 which are required to maintain the chromosome integrity in higher eukaryote

高等真核生物维持染色体完整性所需的新型RNAi因子DRH-3和E1的分子功能研究

• 批准号: 23590074
• 负责人: EKI Toshihiko
• 金额: $ 3.49万
• 依托单位: Toyohashi University of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23590074/
• 关键词: ダイサー関連ヘリカーゼ; RNA干渉; 線虫; タンパク質機能解析; ヘリカーゼ

This study has aimed to clarify the molecular function of two RNAi factors DRH-3 (Dicer Related Helicase-3) and E1 (a novel protein with two Tudor domains) that I originally found to be indispensable for germ-line formation in C. elegans. In this study, I generated the DNA constructs for expression of 10 mutated proteins and successfully prepared His- and GST-tagged-native and some of mutated versions of DRH-3 and E1 proteins using the E. coli protein expression system, and showed the physical interaction between DRH-3 and E1 by pull-down method with differently tagged-native proteins. In addition, genetic and cytological observations on both genes have suggested that DRH-3 and E1 proteins act in the same pathway of RNAi in nucleus.

这项研究旨在阐明我最初发现的两个RNAi因子DRH-3（DICER相关的解旋酶-3）和E1（具有两个都铎王子结构域的新型蛋白）的分子功能，我最初发现这对于秀丽隐杆线虫中的生殖线形成是必不可少的。在这项研究中，我生成了使用大肠杆菌蛋白表达系统的10种突变蛋白表达的DNA构建体，并成功制备了DRH-3和E1蛋白的某些突变版本，并显示了通过与不同标记的新型蛋白质进行的DRH-3和E1的物理相互作用。此外，对这两个基因的遗传和细胞学观察结果表明，DRH-3和E1蛋白在核中RNAi相同的途径中起作用。

项目成果

Trapping DNA replication origins from the human genome.

• DOI: 10.3390/genes4020198
• 发表时间: 2013-04-17
• 期刊: Genes
• 影响因子: 3.5
• 作者: Eki T;Murakami Y;Hanaoka F
• 通讯作者: Hanaoka F

理工系学生のための生命科学・環境科学

面向理工科学生的生命科学和环境科学

• 发表时间: 2011
• 作者: 濵田ひかり;土屋創健;杉本幸彦;Akira Tokumura;Matsumoto C;浴俊彦,他
• 通讯作者: 浴俊彦,他

Ecotoxicology Around the Grobe

全球生态毒理学

• 发表时间: 2011
• 作者: 関根（鈴木） 絵美子;中西 郁夫;上野 恵美;下川 卓志;松本 謙一郎;今井 高志;安西 和紀;村上 健;Watanabe K;土屋創健;横田美帆他;Toshihiko Eki,他
• 通讯作者: Toshihiko Eki,他

分子細胞生物学事典

分子和细胞生物学百科全书

• 发表时间: 2013
• 作者: 浴 俊彦;他;加藤綾華;浴俊彦,他
• 通讯作者: 浴俊彦,他

Systematic screening for RNAi-related proteins that interact with a novel Dicer-like RNA helicase DRH-3 in C. elegans

系统筛选与秀丽隐杆线虫中新型 Dicer 样 RNA 解旋酶 DRH-3 相互作用的 RNAi 相关蛋白

• 发表时间: 2012
• 作者: 和氣 司;大久保 敬;福住 俊一;鎌田 正;松本 謙一郎;中西 郁夫;Keita Horioka
• 通讯作者: Keita Horioka