The study on molecular functions of the novel RNAi factors DRH-3 and E1 which are required to maintain the chromosome integrity in higher eukaryote

高等真核生物维持染色体完整性所需的新型RNAi因子DRH-3和E1的分子功能研究

• 批准号: 23590074
• 负责人: EKI Toshihiko
• 金额: $ 3.49万
• 依托单位: Toyohashi University of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23590074/
• 关键词: ダイサー関連ヘリカーゼ; RNA干渉; 線虫; タンパク質機能解析; ヘリカーゼ

This study has aimed to clarify the molecular function of two RNAi factors DRH-3 (Dicer Related Helicase-3) and E1 (a novel protein with two Tudor domains) that I originally found to be indispensable for germ-line formation in C. elegans. In this study, I generated the DNA constructs for expression of 10 mutated proteins and successfully prepared His- and GST-tagged-native and some of mutated versions of DRH-3 and E1 proteins using the E. coli protein expression system, and showed the physical interaction between DRH-3 and E1 by pull-down method with differently tagged-native proteins. In addition, genetic and cytological observations on both genes have suggested that DRH-3 and E1 proteins act in the same pathway of RNAi in nucleus.

本研究旨在阐明两个RNAi因子DRH-3（Dicer Related Helicase-3）和E1（一种新的具有两个Tudor结构域的蛋白质）的分子功能，这两个RNAi因子是我最初发现的在C.优雅的。在本研究中，我构建了表达10个突变蛋白的DNA构建体，并成功地制备了His和GST标记的DRH-3和E1蛋白的天然和一些突变版本。coli蛋白表达系统中，通过pull-down方法显示DRH-3与E1蛋白的相互作用。此外，对这两个基因的遗传学和细胞学观察表明，DRH-3和E1蛋白在细胞核中的RNAi途径相同。

项目成果

Trapping DNA replication origins from the human genome.

• DOI: 10.3390/genes4020198
• 发表时间: 2013-04-17
• 期刊: Genes
• 影响因子: 3.5
• 作者: Eki T;Murakami Y;Hanaoka F
• 通讯作者: Hanaoka F

Advances in Genetics Research.Volume 3

遗传学研究进展第 3 卷

• 发表时间: 2011
• 作者: Hattori A;et al.;Toshihiko Eki
• 通讯作者: Toshihiko Eki

染色体動態制御に必須な線虫RNA干渉タンパク質DRH-3の機能解析

线虫 RNA 干扰蛋白 DRH-3 的功能分析，该蛋白对于调节染色体动力学至关重要

• 发表时间: 2013
• 作者: 和氣司;五十嵐欽太郎;関根(鈴木)絵美子;福井浩二;鎌田正;小澤俊彦;村上健;松本謙一郎;中西郁夫;木内絵梨奈,渡邊健太,平田美智子,稲田全規,宮浦千里;渡部周二
• 通讯作者: 渡部周二

Further characterization of drh-3 RNAi-treated nematode C. elegans

drh-3 RNAi 处理的线虫秀丽隐杆线虫的进一步表征

• 发表时间: 2011
• 作者: 小川 幸大;上野 恵美;関根（鈴木） 絵美子;中西 郁夫;松本 謙一郎;Toshihiko Eki
• 通讯作者: Toshihiko Eki

線虫の染色体動態制御に関与する新規Tudorドメインタンパク質の調製と解析

参与调节线虫染色体动力学的新型 Tudor 结构域蛋白的制备和分析

• 发表时间: 2014
• 作者: 水嶋祐太,富成司;松本千穂;稲田全規,宮浦千里;洲崎和真
• 通讯作者: 洲崎和真