课题基金 / 基金详情

ゲノムワイドRNA干渉スクリーニング法による腫瘍溶解RNAウイルス増殖機構の解明

ゲノムワイドRNA干渉スクリーニング法による腫瘍溶解RNAウイルス増殖機構の解明
利用全基因组RNA干扰筛选方法阐明溶瘤RNA病毒增殖机制
批准号：
25430151
负责人：
井上 博之
金额：
$3.41万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2013
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2013-04-01 至 2015-03-31
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-25430151/
关键词：
腫瘍溶解性ウイルス療法エンテロウイルスゲノムワイドRNA干渉法腫瘍溶解性ウイルスﾊｲｽﾙｰﾌﾟｯﾄｽｸﾘｰﾆﾝｸﾞRNA干渉

项目摘要

项目成果

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中文摘要
翻译
まず、in vitro細胞傷害性試験（クリスタルバイオレット法）の結果、CVA11感染により標準治療抵抗性ヒト癌細胞であるオキサリプラチン抵抗性大腸癌細胞（WiDr）、トリプルネガティブ乳癌細胞(MDA-MB231及びMDA-MB432) 、EGFRチロシンキナーゼ阻害剤ゲフィチニブ２次耐性小細胞肺癌細胞（H1975）あるいは乳癌MCF7細胞に対し、高い殺細胞傷害性を呈した（MOI=0.001～0.1）。次に、ハイスループットRNA干渉スクリーニング法に用いるレンチウイルスshRNAライブラリー（DCIPHER, Human module 1, 5000 gene targerts, 27,500 shRNAs）を293T細胞へトランスフェクションし構築し、上記レンチウイルスshRNAライブラリーをH1975肺腺癌及びMESO4悪性中皮腫細胞株に感染させ、各遺伝子ノックダウンした後、腫瘍溶解性RNAウイルス（CVA11）を感染させ腫瘍溶解性に抵抗性を示す癌細胞コロニーが出現することを確認した。癌細胞コロニーを回収し細胞ペレットよりRNAを抽出後、次世代シークエンスによる挿入遺伝子配列を解析した結果、VHL, BTK, IGFBP3、CARD6、MADD、TRAF4等のアポトーシスを含む細胞死関連分子及びSOX2等の幹細胞関連分子が同定された。実際に、アポトーシスを阻害する汎カスパーゼ阻害剤をCVA11感染時に併用したところ、癌細胞傷害性が有意に減少したことからアポトーシス経路がCVA11ウイルス増殖に関与している可能性が示唆された。
英文摘要
まず、in vitro細胞傷害性試験（クリスタルバイオレット法）の結果、CVA11感染により標準治療抵抗性ヒト癌細胞であるオキサリプラチン抵抗性大腸癌細胞（WiDr）、トリプルネガティブ乳癌細胞(MDA-MB231及びMDA-MB432) 、EGFRチロシンキナーゼ阻害剤ゲフィチニブ２次耐性小細胞肺癌細胞（H1975）あるいは乳癌MCF7細胞に対し、高い殺細胞傷害性を呈した（MOI=0.001～0.1）。次に、ハイスループットRNA干渉スクリーニング法に用いるレンチウイルスshRNAライブラリー（DCIPHER, Human module 1, 5000 gene targerts, 27,500 shRNAs）を293T細胞へトランスフェクションし構築し、上記レンチウイルスshRNAライブラリーをH1975肺腺癌及びMESO4悪性中皮腫細胞株に感染させ、各遺伝子ノックダウンした後、腫瘍溶解性RNAウイルス（CVA11）を感染させ腫瘍溶解性に抵抗性を示す癌細胞コロニーが出現することを確認した。癌細胞コロニーを回収し細胞ペレットよりRNAを抽出後、次世代シークエンスによる挿入遺伝子配列を解析した結果、VHL, BTK, IGFBP3、CARD6、MADD、TRAF4等のアポトーシスを含む細胞死関連分子及びSOX2等の幹細胞関連分子が同定された。実際に、アポトーシスを阻害する汎カスパーゼ阻害剤をCVA11感染時に併用したところ、癌細胞傷害性が有意に減少したことからアポトーシス経路がCVA11ウイルス増殖に関与している可能性が示唆された。
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会议论文
Coxsackievirus A11 exhibits ICAM-1-mediated oncolysis against human non-small cell lung cancer cells.
柯萨奇病毒 A11 对人非小细胞肺癌细胞表现出 ICAM-1 介导的溶瘤作用。
DOI： --
发表时间： 2014
期刊：
影响因子： --
作者： [筒井麻衣, 川久保博文, 林田哲, 福田和正, 竹内裕也, 北川雄光, HIROYUKI INOUE]
通讯作者： HIROYUKI INOUE
ヒトエンテロウイルスを用いた新規腫瘍溶解性ウイルス療法の開発
利用人肠道病毒开发新型溶瘤病毒疗法
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
新規腫瘍溶解性ウイルス
新型溶瘤病毒
DOI： --
发表时间： 2014
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Coxsackievirus A11 displays remarkable oncolytic activity against human non-small cell lung cancer cells.
柯萨奇病毒 A11 对人类非小细胞肺癌细胞表现出显着的溶瘤活性。
DOI： --
发表时间： 2014
期刊：
影响因子： --
作者： [筒井麻衣, 川久保博文, 林田哲, 福田和正, 竹内裕也, 北川雄光, HIROYUKI INOUE, HIROYUKI INOUE]
通讯作者： HIROYUKI INOUE
Exploratory study of novel predictors of therapeutic efficacy of immune checkpoint inhibitors based on humoral immunological analysis
  • 批准号：
    23K06781
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 资助金额：
    $3.0万
  • 财政年份：
    2023
  • 负责人：
    井上 博之
  • 依托单位：
    Fukuoka University
Research on Dataset for Attack Evaluation of In-vehicle Systems and Fuzz Data Generation
  • 批准号：
    21K11892
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 资助金额：
    $2.58万
  • 财政年份：
    2021
  • 负责人：
    井上 博之
  • 依托单位：
    Kyoto Sangyo University
Development of a screening method for toxic substances by a miniaturized toroidal ion trap mass spectrometer
Blockade of specific ion and water transports enhances hypotonicity-induced cytocidal effects for pancreatic cancer stem cells
  • 批准号：
    18K16325
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
  • 资助金额：
    $2.66万
  • 财政年份：
    2018
  • 负责人：
    井上 博之
  • 依托单位：
    Kyoto Prefectural University of Medicine
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