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細胞間接着形成時のアクチン細胞骨格再構成を制御する分子機構の解析

细胞-细胞粘附形成过程中控制肌动蛋白细胞骨架重组的分子机制分析

基本信息

批准号：
11J00990
负责人：
東智仁
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011 至 2013
项目状态：
已结题

项目摘要

細胞間接着部位の裏打ちアクチン細胞骨格の構築過程を明らかにするため、その制御因子の解析を引き続き行って来た。これまで、低分子量Gタンパク質RhoAの活性化因子であるPDZ-RhoGEFがマウスの上皮組織および培養上皮細胞において細胞間接着部位に局在する事、PDZ-RhoGEFノックダウン細胞において、細胞間接着形成時に一過的に細胞間接着と垂直方向に伸びるアクチン繊維(ラディアルアクチン繊維)の形成が見られない事を明らかにしてきた。また、PDZ-RhoGEFを再発現したレスキュー細胞においては、ラディアルアクチン繊維形成がレスキューされること、RhoGEF活性をなくした変異体ではレスキューできない事を確認したPさらに、PDZ-RhoGEFノックダウン細胞が三次元培養系において、中空のシスト構造を形成できない事を明らかにし、これらの結果を元に論文投稿準備中である。今年度は、秋より米国ミシガン大学のAnn Miller研に海外渡航し、アフリカツメガエル胚を用いて細胞間接着形成を観察する実験に取り組んで来た。Miller研では、活性型のRhoを特異的に感度よく検出できるプローブを用いることができ、また、繊維状アクチンをLifeActおよびUtrophinで、密着結合をZO-1で、接着結合をE-cadherinで可視化する事ができ、これらを用いて細胞間接着形成時のRhoの活性化状態を評価する事を目指している。また、細胞間接着形成機構の解析の過程で見いだした、1回膜貫通型タンパク質ILDR1とILDR2が三細胞間接着部位に局在し、別の三細胞間接着因子tricellulinの局在化と上皮バリア機能の確立に重要である、という結果を元に、現在ILDR1のノックアウトマウスの解析を進めている。

The following parts of the cell are used to analyze the control factors and introduce the control factors in the process. The activation factor of low molecular weight G-terminal RhoA, the activation factor of PDZ-RhoGEF protein, the epithelial tissue culture, the intercellular site of epithelial cell culture, the cell cycle of PDZ-RhoGEF, the activation factor of DNA, the cell cycle of epithelial cell culture, the location of cell cycle, When the cells are then formed, the cells that pass through each other are then stretched vertically to form a device that is sensitive to each other. This is the first time that you can make sure that there are three times of cell culture, that is, the three times of cell culture, the three times of cell culture, that is, PDZ-RhoGEF, PDZ-RhoGEF, and so on, do not know how to make sure that you do not know what to do, and that you can make sure that there are three steps in the process of cell culture, that is, the three times of cell culture. The results show that the submission of the article is in preparation for submission. This year, this year, the Ann Miller of the University of Malaysia in the United States will conduct overseas voyage research, and then the inspection and acquisition organization will be formed in the cell of the embryo. The sensitivities of Miller research and active Rho devices show that the equipment is used to detect the Utrophin of the Utrophin, the combination of the ZO-1, the combination of the ZO-1, and then the combination of the E-cadherin, the temperature, the temperature and the temperature. The following is the formation of the mechanism for the analysis of the process of ILDR1, the formation of the mechanism, and the analysis of the three parts of the cell of the membrane-mediated cell cycle, one-loop membrane transfer, ILDR1 and ILDR2. The following factors are located between the cells of the cell and the other, and the tricellulin is able to confirm the important data in the chemical epithelium, and the results of the analysis, and the results of the analysis are now in progress.