新規接着分子LRRTMによるシナプス形成促進機構の解明

阐明新型粘附分子LRRTM促进突触形成的机制

• 批准号: 11J01107
• 负责人: 湊原 圭一郎
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11J01107/
• 关键词: 接着分子; シナプス後肥厚; シナプス接着分子; シナプス形成

シナプス後膜ではシナプス伝達を担うさまざまなタンパク質が集積し、シナプス後肥厚とよばれる複合分子集合体が形成されている。シナプス接着分子はシナプス後肥厚形成の核として機能すると考えられている。シナプス接着分子のひとつであるLRRTMは一回膜貫通型の膜タンパク質であり、LRRTM1からLRRTM4までの4つのサブタイプが存在する。これらLRRTMの神経細胞内での局在の大きな特徴のひとつとして、シナプス後肥厚に高度に局在することが知られている。今年度はLRRTMの細胞内領域によるシナプスへの高度な局在機構に着目し、その分子機構による新規のシナプス形成促進機構を解明することを目指した。LRRTMの各サブタイプを発現させた海馬神経初代培養細胞に対して免疫蛍光染色を施し、LRRTMのシナプスへの局在効率を定量的に解析した結果、野生型のLRRTMはシナプスに高度に集積するのに対して、細胞内ドメインを欠損させた変異体ではシナプス部位への集積効率が野生型に比べて減少することが明らかになった。また、細胞外ビオチン標識と定量的免疫ブロッティングを組み合わせた解析により、一部のLRRTMサブタイプにおいて細胞内領域欠損変異体で細胞表面への発現量が野生型に比べて増大することが明らかになった。さらに、これらの欠損変異体は野生型とは異なる糖鎖修飾を受けていることから、野生型とは異なる発現制御を受けている可能性が示唆された。次に、LRRTMの一連の欠損変異およびアミノ酸置換変異実験を行ったところ、細胞表面への発現量変化およびシナプスへの効率的な局在に関わる細胞内領域中の責任配列を特定することに成功した。最後に、シナプスへの集積効率が低いLRRTMの変異体を発現させた神経細胞では、野生型LRRTMを発現させた場合と比べて、足場タンパク質の低い集積度合いを示した。以上の結果から、LRRTMの細胞内領域による効率的なシナプスへの局在機構はシナプスの成熟化を促進することが示唆された。

A complex molecular assembly is formed by the aggregation of the complex molecules and the thickening of the complex molecules A study of the nuclear function of the hypertrophic formation of the following molecules LRRTM is a film through type film through type film type film through type film type film The characteristics of LRRTM's neurons are large, and their post-hypertrophy is high. This year, the LRRTM intracellular domain is a highly functional organization, and the molecular structure is a new mechanism to promote the formation of the organization. The results of quantitative analysis of the accumulation of LRRTM protein in primary cultured hippocampal neurons by immunoluminescence staining and the accumulation of LRRTM protein in primary cultured hippocampal neurons showed that the accumulation of wild type LRRTM protein in primary cultured hippocampal neurons decreased compared with wild type LRRTM. In addition, the expression of the extracellular protein marker and quantitative immune response protein was increased compared with wild-type protein. The possibility that the mutant gene is affected by the mutant gene is demonstrated. In addition, LRRTM's continuous loss variation and acid displacement variation are successfully carried out, and the occurrence variation and efficiency of cell surface degradation are successfully determined in the intracellular domain. Finally, the low concentration rate of LRRTM is shown in the presence of allogeneic and wild-type LRRTM in the presence of low concentration rate of LRRTM in the presence of allogeneic and wild-type LRRTM. The above results show that the efficiency of LRRTM in the intracellular domain and the maturation of LRRTM in the local structure are promoted.

项目成果

Ligand binding of PDZ domains has various roles in the synaptic clustering of SAP102 and PSD-95

• DOI: 10.1016/j.neulet.2012.11.019
• 发表时间: 2013-01
• 期刊: Neuroscience Letters
• 影响因子: 2.5
• 作者: Keiichiro Minatohara;Shōgo Ichikawa;Tatsuya Seki;Y. Fujiyoshi;T. Doi

The cytoplasmic domain regulates cell surface trafficking of a synaptic cell adhesion molecule, LRRTM2

细胞质结构域调节突触细胞粘附分子 LRRTM2 的细胞表面运输

• 发表时间: 2013
• 作者: Keiichiro Minatohara;et al.
• 通讯作者: et al.

シナプス接着分子LRRTM2の細胞内領域による細胞表面および樹状突起への局在制御

细胞内区域控制突触粘附分子 LRRTM2 定位到细胞表面和树突

• 发表时间: 2013
• 作者: Ryoyo Ikebuchi;Satoru Konnai;Tomohiro Okagawa;Kazumasa Yokoyma;Chie Nakajima;Yasuhiko Suzuki;Shiro Murata;Kazuhiko Ohashi.;湊原 圭一郎
• 通讯作者: 湊原 圭一郎

シナプス接着分子LRRTM2欠損型マウスの解析

突触粘附分子 LRRTM2 缺陷小鼠的分析

• 发表时间: 2011
• 作者: Keiichiro Minatohara;et al.;湊原圭一郎
• 通讯作者: 湊原圭一郎