成体新生嗅球ニューロンの定着部位を規定する血管性ニッチ

血管生态位定义成人新生嗅球神经元的定植位点

• 批准号: 11J02650
• 负责人: 澤田 雅人
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11J02650/
• 关键词: 成体脳のニューロン新生; 脳室下帯; 嗅球; 介在ニューロン; 細胞移動; 血管; ターンオーバー; グリア

個体の発生期において、神経系及び血管系の発生メカニズムは多くの点で共通である。一方、成体脳では神経系及び血管系が完成しているが、神経幹細胞から産生される新生ニューロンは血管と相互作用することが報告されており、成体脳における神経血管相互作用の重要性が示唆されている。我々は嗅球ニューロンのターンオーバーが血管近傍で生じることを見いだしたので、嗅球ニューロンのターンオーバーの場所を規定する血管性ニッチの分子基盤を解明することを本研究の目的とした。前年度に、嗅球ニューロンの移動がSema3E-PlexinD1シグナルで制御されることを示唆するデータを得たため、本年度はその分子メカニズムと血管との相互作用について解析した。1.FACSで分取した細胞種で候補分子の発現をRT-PCR法で確認する。FACSの代わりに、細胞種特異的な発現を明らかにすることができる免疫染色法で発現パターンを調べた結果、Sema3Eは表層の嗅球介在ニューロンの一部に発現することを明らかにした。2.shRNAを用いて候補分子をノックダウンする。PlexinD1のshRNAもしくはcDNAを発現するレンチウィルスを作製し、in vivoにおけるPlexinD1ノックダウン実験および過剰発現実験を行った結果、PlexinD1が新生ニューロンの移動を促進することを明らかにした。次に、Sema3Eが新生ニューロンに与える影響をin vitroで検討した結果、Sema3Eは新生ニューロンの移動形態を制御していることが分かった。この効果はPlexinD1のノックダウンでキャンセルされることも確認した。3.In vivoイメージング法で候補分子欠損の影響を明らかにする。二光子顕微鏡を用いてin vivoで新生ニューロンの形態を解析するために、Dcx-GFPマウスを用いた移植法を確立し、固定脳で二光子顕微鏡観察できることを確認した。また、新生ニューロンの定着および細胞死が血管近傍で生じていることを定量的に解析した。以上より、Sema3E-PlexinD1による新生ニューロンの移動形態の制御が、新生ニューロンの血管近傍での定着の過程に関与する可能性がある。

在个体的新生阶段，神经和血管系统的发育机制在许多方面都是常见的。另一方面，尽管成人大脑中神经系统和血管系统是完整的，但据报道，由神经干细胞产生的新遗传神经元与血管相互作用，这表明成人大脑中神经血管相互作用的重要性。由于我们发现嗅球神经元的营业额在血管附近发生，因此这项研究的目的是阐明定义嗅觉鳞茎神经元转移位置的血管生态位的分子基础。在上一年，获得了数据，以表明嗅球神经元的运动受SEMA3E-PLEXIND1信号的调节，今年我们分析了其分子机制和血管之间的相互作用。 1。通过RT-PCR方法在FACS收集的细胞类型中通过RT-PCR方法证实了候选分子的表达。我们使用可以揭示细胞类型特异性表达的免疫染色方法研究了表达模式，而是发现SEMA3E在某些浅表嗅球中间神经元中表达。 2。使用shRNA击倒候选分子。产生了表达Plexind1的shRNA或cDNA的慢病毒，并在体内进行了Plexind1敲低和过表达实验，并且发现Plexind1促进了新遗传神经元的迁移。接下来，我们研究了SEMA3E在体外对新遗传神经元的影响，发现SEMA3E调节了新遗传神经元的迁移形态。也证实，这种效果被Plexind1的敲低取消。 3。阐明候选分子缺陷的影响的体内成像方法。为了使用两光子显微镜在体内分析新遗传神经元的形态，我们使用DCX-GFP小鼠建立了一种移植方法，并确认可以在固定的大脑中进行两光子显微镜观察。此外，我们定量分析了血管附近发生的新遗传神经元的定植和细胞死亡。从上面，Sema3e-Plexind1对新遗传神经元的迁移形态的调节可能参与了新遗传神经元血管附近的定殖过程。

项目成果

Functions and spatiotemporal activation patterns of Rho family GTPases in living new neurons migrating in the postnatal mouse brain

Rho家族GTP酶在出生后小鼠大脑中迁移的活新神经元中的功能和时空激活模式

• 发表时间: 2012
• 作者: Takao Hikita;Akihisa Ohno;Masato Sawada;Haruko Ota;Michiyuki Matsuda;and Kazunobu Sawamoto.
• 通讯作者: and Kazunobu Sawamoto.

増殖因子の徐放化による正常脳及び傷害脳における脳室下帯ニューロン新生の賦活化

通过生长因子的持续释放激活正常和受损大脑的室下区神经发生

• 发表时间: 2013
• 作者: 神農英雄;澤田雅人;中口加奈子;金子奈穂子;匹田貴夫;斎藤伸治;田畑泰彦;澤本和延
• 通讯作者: 澤本和延

Neuronal Migration in the Adult Brain In(T.Seki, K.Sawamoto, J.M.Parent, & A.Alvarez-Buylla, eds)(Neurogenesis in the Adult Brain I, Neurobiology)

成人大脑中的神经元迁移（T.Seki，K.Sawamoto，J.M.Parent，

• 发表时间: 2011
• 作者: Masato Sawada;Shi-hui Huang;Yuki Hirota;Naoko Kaneko;Kazunobu Sawamoto
• 通讯作者: Kazunobu Sawamoto

Mechanisms for layer-specific sorting of distinct interneuron subtypes migrating in the postnatal olfactory bulb

出生后嗅球中迁移的不同中间神经元亚型的层特异性分类机制

• 发表时间: 2012
• 作者: Masato Sawada;Shih-hui Huang;and Kazunobu Sawamoto.
• 通讯作者: and Kazunobu Sawamoto.

Roles of Planar Cell Polarity Signaling in Maturation of Neuronal Precursor Cells in the Postnatal Mouse Olfactory Bulb

• DOI: 10.1002/stem.1137
• 发表时间: 2012-08-01
• 期刊: STEM CELLS
• 影响因子: 5.2
• 作者: Hirota, Yuki;Sawada, Masato;Sawamoto, Kazunobu
• 通讯作者: Sawamoto, Kazunobu