マツカワメラノコルチン受容体(MCR)のヘテロマー形成の可能性

松川黑皮质素受体 (MCR) 异聚体形成的可能性

• 批准号: 11J06342
• 负责人: 小林 勇喜
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11J06342/
• 关键词: Xenopus tropicalis; マツカワ; メラニン凝集ホルモン; 黒色素胞刺激ホルモン; 細胞内シグナル; Gタンパク質選択性; ヘテロダイマー; 体色調節; メラニン凝集ホルモン受容体; メラノコルチン受容体

【Xenopus tropicalisを用いたメラニン凝集ホルモン(MCH)システムの解明】これまでに、X. tropicahsから4種類のメラニン凝集ホルモン受容体(XMCHR1a、1b、2a、2b)をクローン化し、細胞内シグナルを指標に受容体機能を精査した。その結果、MCHR2bのみCa^<2+>濃度、GTPγS結合能、ERK及び70S6Kリン酸化、cAMP量測定の全てにおいて、活性は認められなかった。そこで、CHO-K1細胞を用いてXMCHR2bの細胞内局在を免疫化学染色により調べたところ、他のXMCHRsと同様に細胞膜上に局在していた。さらに、XMCHRのリガンドであるXMCHを添加し、細胞内局在を調べたところ、XMCHR2bのインターナリゼーションが認められた。以上より、XMCHR2bは一般的な細胞内シグナルを活性化しないが、機能的な受容体だと考えられる。このような特徴を有するMCHRの報告は本研究が初である。興味深いことに、XMCHR2bはX. tropicalisのほぼ全ての組織で発現する。中でも、皮膚ではXMCHR1bと共に体色調節に関わる可能性を昨年度明らかにした。そこで、XMCHR1bとXMCHR2bの関係を探るべく、両受容体をCHO-K1細胞に共導入し、免疫化学染色を行った。その結果、XMCHR1bとXMCHR2bの多くが細胞膜上で共発現すること、XMCH添加により、両者のほとんどが共にインターナリゼーションすることを認めた。よって、X. tropicalisの皮膚では、XMCHR1bとXMCHR2bが相互的(2量体形成等)に体色調節に関与すると考えられる。しかしながら、少数認められたXMCHR2bの単独での挙動については謎である。【マツカワ・メラノコルチン受容体(MCR)のヘテロマー形成の可能性】昨年度までに、マツカワMC1RとMC5Rがヘテロダイマーを形成する可能性を示す多くのデータを得た。本年度は残された課題であった免疫沈降法による生化学的解析を行い、MC1Rの免疫沈降画分にMC5Rも検出されることを明らかにした。さらに、フローサイトメトリー解析により、CHO細胞発現系では、MC1RとMC5Rの極一部がヘテロダイマーを形成していることを明らかにした。

【 Xenopus tropicalis を with い た メ ラ ニ ン agglutination ホ ル モ ン (MCH) シ ス テ ム の interpret 】 こ れ ま で に, X. Tropicahs か ら 4 kinds の メ ラ ニ ン agglutination ホ ル モ ン by let body (XMCHR1a, 1 b, 2 a, 2 b) を ク ロ ー ン し, intracellular シ グ ナ ル に を index by the capacity of body function を fine check し た. そ の results, MCHR2b の み Ca ^ > < 2 + concentration, GTP binding energy gamma S made, ERK and び 70 s6k リ ン acidification, cAMP quantity determination の て に お い て, active は め ら れ な か っ た. そ こ で, CHO K1 cells を using い て XMCHR2b bureau in を の cell immunochemical staining に よ り adjustable べ た と こ ろ, he の XMCHRs と with others に membrane に bureau in し て い た. さ ら に, XMCHR の リ ガ ン ド で あ る XMCH を add し, intracellular bureau in を べ た と こ ろ, XMCHR2b の イ ン タ ー ナ リ ゼ ー シ ョ ン が recognize め ら れ た. Above よ り, XMCHR2b は general な intracellular シ グ ナ ル を activeness し な い が, functional な let body だ と exam え ら れ る. <s:1> ような characteristics を there is a するMCHR <e:1> report this study が initial である. Deeply interested: とに て とに, XMCHR2b ほぼ X. tropicalis <s:1> ほぼ all て て で present する. In で も, skin で は XMCHR1b と に total body color adjustment に masato わ る possibility を yesterday annual Ming ら か に し た. そ こ で, XMCHR1b と XMCHR2b の masato is を agent る べ く, struck the body を CHO cells - K1 に total import し, immunochemical staining を っ た. そ の results, XMCHR1b と XMCHR2b の more く が membrane で 発 now total す る こ と, XMCH add に よ り, struck の ほ と ん ど が altogether に イ ン タ ー ナ リ ゼ ー シ ョ ン す る こ と を recognize め た. The relationship between よって, X. tropicalis <s:1> skin で で, XMCHR1bと, XMCHR2bが (2 volume formation, etc.)に body color regulation に and すると studies えられる. <s:1> で ながら, a few agree められたXMCHR2b <s:1> 単 independent で 挙 挙 movement に て て て て である mystery である. 【 マ ツ カ ワ · メ ラ ノ コ ル チ ン by let body (MCR) の ヘ テ ロ マ ー formation possibility の 】 yesterday annual ま で に, マ ツ カ ワ MC1R と MC5R が ヘ テ ロ ダ イ マ ー を form す る す を more likely く の デ ー タ を た. This year's は residual さ れ た subject で あ っ た immune sink method に よ る biochemical analytical を い, MC1R の immune sink drawing points に MC5R も 検 out さ れ る こ と を Ming ら か に し た. さ ら に, フ ロ ー サ イ ト メ ト リ ー parsing に よ り, CHO cells 発 now で は, MC1R と MC5R の is extremely a が ヘ テ ロ ダ イ マ ー を form し て い る こ と を Ming ら か に し た.

项目成果

魚類体色変化における MSH システム

MSH系统在鱼体颜色变化中的作用

• 发表时间: 2012
• 作者: Takei;K;仲嶺三代美;小林勇喜 濱本明恵 高橋明義 斎藤祐見子
• 通讯作者: 小林勇喜 濱本明恵 高橋明義 斎藤祐見子

Pigment-dispersing activities and cortisol-releasing activities of melanocortins and their receptors in xanthophores and head kidneys of the goldfish Carassius auratus

• DOI: 10.1016/j.ygcen.2011.06.019
• 发表时间: 2011-09-15
• 期刊: GENERAL AND COMPARATIVE ENDOCRINOLOGY
• 影响因子: 2.7
• 作者: Kobayashi, Yuki;Chiba, Hiroaki;Takahashi, Akiyoshi
• 通讯作者: Takahashi, Akiyoshi

Identification of discrete amino acids that responsible for Gi/o selectivity by melanin-concentrating hormone receptor 1

黑色素浓缩激素受体 1 鉴定负责 Gi/o 选择性的离散氨基酸

• 发表时间: 2013
• 作者: Hamamoto A;Kobayashi Y;Horikawa M;Saito Y
• 通讯作者: Saito Y

Gi/o 選択的に活性低下を示すメラニン凝集ホルモン受容体 1 変異体の解析

黑色素浓缩激素受体 1 突变体的分析显示 Gi/o 选择性降低的活性

• 发表时间: 2013
• 作者: 池谷真澄;栗原裕司;佐藤泰史;五嶋良郎;竹居光太郎;田口一馬 斎藤祐見子;濱本明恵 小林勇喜 堀川学 斎藤祐見子
• 通讯作者: 濱本明恵 小林勇喜 堀川学 斎藤祐見子

ネツタイツメガエル(Xenopus Tropicalis)MCHRのGタンパク質選択性と皮膚における役割

热带爪蟾MCHR的G蛋白选择性及其在皮肤中的作用

• 发表时间: 2012
• 作者: 小林勇喜;平山大;濱本明恵;斎藤祐見子
• 通讯作者: 斎藤祐見子