小胞体－ゴルジ体間相互作用に着目したＥＲ　ｅｘｉｔ　ｓｉｔｅ形成機構の解明

阐明内质网出口位点形成机制，重点关注内质网和高尔基体之间的相互作用

• 批准号: 12J01880
• 负责人: 高木 純平
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J01880/
• 关键词: 小胞輸送; 小胞体; ゴルジ体; COPII; MAIGO; MAGボディ; ER exit sites; MAIGO変異体

MAG5は小胞体-ゴルジ体間のタンパク質輸送にかかわる因子として同定され, これまでに小胞体からゴルジ体への輸送小胞, COPII小胞の形成が起きる小胞体膜状のドメインERexitsitesに局在することを明らかにした.今年度はMAG5がERexitsitesにおいてCOPII小胞形成にどのような役割を果たしているのかについて焦点を当て, 下記の詳細な解析を行った. COPII構成因子の膜への結合量について, COPII構成因子を発現する野生型植物体とmag5変異体植物体を材料に, 分画遠心を用いて生化学的に解析を行った. その結果, MAG5はCOPII構成因子の膜への結合に関して蟹的に影響を与えないことが示唆された. 続いて, COPII構成因子のER exit sitesにおける動態について調べるために, COPII構成因子を発現する野生型植物体とmag5変異体植物体を材料に, FRAP解析を行った. FRAP解析に関しては, ミシガン州立大学のFederica教授のグループとの共同研究により行った. その結果, MAG5の欠損により, COPII構成因子が膜から解離しやすくなっていることが明らかになった. 以上の解析から, MAG5はERexitsitesにおいて, COPIIコートを安定化することにより適切なCOPII小胞形成を担っていることが示唆された.小胞体―ゴルジ体間のタンパク質輸送にかかわる新しい因子をさらに同定する目的で, 正遺伝学的な解析を行った. 小胞体一ゴルジ体間のタンパク質輸送に異常を示す変異体の種子細胞においては, 種子貯蔵タンパク質は小胞体内の異常な構造体MAGボディに異常蓄積することが知られている. MAGボディ異常蓄積に着目した独自のスクリーニング系を用いて, 3系統の輸送変異体を単離することができた.

MAG5 is a factor in the transport of COPII between small cells and small cells, and the formation of COPII cells in small cell membrane-like sites is also a factor in the transport of COPII between small cells and small cells. This year, MAG5 has been selected for ERexitsites, and COPII cells are formed in the following ways: COPII components and membrane binding levels are determined. COPII components are detected in wild-type plants and mag5 allogeneic plants. The results show that MAG5 is related to the membrane binding of COPII components. In addition, COPII components of ER exit sites are dynamically modulated, COPII components are generated, wild-type plants and mag5 allogeneic plants are generated, and FRAP analysis is performed. FRAP analysis is a joint research project conducted by Federica professors at the University of Michigan. As a result, MAG5 is deficient in COPII, and COPII components are dissociated from the membrane. The above analysis shows that MAG5 is responsible for the stabilization of COPII cells. For the purpose of determining the new factors in the transport of substances between small cells and small cells, the analysis of positive genes is carried out. Abnormality in the transport of cytoplasm between cells indicates abnormal accumulation of cytoplasm within cells. MAG abnormal accumulation in the eyes of the independent use of the system, 3 system of different types of transport

项目成果

MAG5は小胞体出口部位でCOPIIコートを安定化する

MAG5 在内质网出口位点稳定 COPII 外壳

• 发表时间: 2013
• 作者: Junpei Takagi;Luciana Renna;Hideyuki Takahashi;Yasuko Koumoto;Kentaro Tamura;Giovanni Stefano;Yoichiro Fukao;Maki Kondo;Mikio Nishimura;Tomoo Shimada;Federica Brandizzi;Ikuko Hara-Nishimura;高木純平;高木純平
• 通讯作者: 高木純平

MAIG05 regulates protein export from the endoplasmic reticulum at Golgi-associated ER exit sites in Arabidopsis' (ポスター)

MAIG05 调节拟南芥中高尔基体相关 ER 出口位点内质网的蛋白质输出（海报）

• 发表时间: 2012
• 作者: Junpei Takagi;Luciana Renna;Hideyuki Takahashi;Yasuko Koumoto;Kentaro Tamura;Giovanni Stefano;Yoichiro Fukao;Maki Kondo;Mikio Nishimura;Tomoo Shimada;Federica Brandizzi;Ikuko Hara-Nishimura;高木純平;高木純平;高木純平;高木純平
• 通讯作者: 高木純平

MAIG05はER exit sitesにおいて小胞体からのタンパク質の輸送に関わる(口頭)

MAIG05 参与 ER 出口位点内质网的蛋白质转运（口服）

• 发表时间: 2012
• 作者: Junpei Takagi;Luciana Renna;Hideyuki Takahashi;Yasuko Koumoto;Kentaro Tamura;Giovanni Stefano;Yoichiro Fukao;Maki Kondo;Mikio Nishimura;Tomoo Shimada;Federica Brandizzi;Ikuko Hara-Nishimura;高木純平;高木純平;高木純平
• 通讯作者: 高木純平

MAG5はCOPII構成因子と相互作用しCOPIIコートを安定化する

MAG5 与 COPII 组成因子相互作用并稳定 COPII 涂层

• 发表时间: 2014
• 作者: 高木純平;Luciana Renna;髙橋英之;河本恭子;田村謙太郎;Giovanni Stefano;深尾 陽一朗;近藤真紀;西村幹夫;嶋田知生;Federica Brandizzi;西村いくこ
• 通讯作者: 西村いくこ