構造生物学に基づくマウスフェロモンＥＳＰ１の受容体認識機構の解明

基于结构生物学阐明小鼠信息素ESP1受体识别机制

• 批准号: 12J02683
• 负责人: 平金 真
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J02683/
• 关键词: フェロモン; ESP; G蛋白質共役型受容体; MRI

フェロモンは、ある個体が発し、同種の別個体に受け取られて特定の行動や生理的変化を促す物質である。共同研究者の東原らは、オスマウスの涙よりメスマウスの鋤鼻神経系を活性化する新規の不揮発性ペプチドを同定し、ESP1と命名した。また、ESP1受容体がGタンパク質共役型受容体(GPCR)に属するV2Rp5であることも明らかにした。さらに、我々はESP1がメスマウスの性行動を促進することを解明した。ESP1はリガンドと受容体、そして機能までが明らかになっている哺乳類における初めてのペプチド性フェロモンである。しかしながら、V2Rp5のESP1認識機構やESP1刺激による脳内のシグナル伝達機構などは不明な部分が多い。本研究は、構造生物学的手法を用いてESP1―V2Rp5間の特異的な相互作用機構と受容体の構造変化が引き起こすシグナル伝達機構を解明することを目的とする。また、ESP1の刺激による脳内の活性化部位を明らかにし、フェロモン作用を引き起こす脳内シグナリングを明らかにする。25年度は、V2Rp5のESP1結合領域を同定するため、V2Rp5の変異体解析を行った。V2Rp5変異体は小麦胚芽無細胞系で発現を行い、ESP1とのプルダウンアッセイを行い、V2Rp5細胞外領域のESP1が結合する領域を明らかにした。MRIを用いた活性評価系の構築に取り組んだ。マンガン造影剤を用いて活性化細胞を観測するMEMRI法を用いて、活性評価系の検討を進めた。フェロモンと同様に嗅球を活性化する匂い分子を用いて実験を行い、匂い分子による活性化部位の違いを検出する評価系を構築した。構築した方法をESP1に応用し、ESP1の活性化部位検出法の初期検討を行った。

Each individual or individual may be affected by the physiological changes of a specific activity in order to promote the physiology of the animal. The co-researcher, the co-researcher, was named after the activation, the new rules, the sex, the identity, and the naming of the ESP1. The ESP1 acceptor

项目成果

Expression and purification of mouse peptide ESP4 in Escherichia coil

小鼠肽ESP4在大肠杆菌中的表达与纯化

• DOI: 10.1016/j.pep.2014.01.010
• 发表时间: 2014
• 期刊: Protein Expression and Purification
• 影响因子: 1.6
• 作者: Hirakane M;Taniguchi M;Yoshinaga S;Misumi S;Terasawa H
• 通讯作者: Terasawa H

Structure of the Mouse Sex Peptide Pheromone ESP1 Reveals a Molecular Basis for Specific Binding to the Class C G-protein-coupled Vomeronasal Receptor

小鼠性肽信息素 ESP1 的结构揭示了与 C 类 G 蛋白偶联犁鼻受体特异性结合的分子基础

• DOI: 10.1074/jbc.m112.436782
• 发表时间: 2013
• 期刊: The Journal of Biological Chemistry
• 作者: Yoshinaga S;Sato T;Hirakane M;Esaki K;Hamaguchi T;Haga-Yamanaka S;Tsunoda M;Kimoto H;Shimada I;Touhara K;Terasawa H
• 通讯作者: Terasawa H

マンガン造影MRIによる脳下垂体の活性化とホルモン分泌の研究

利用锰增强MRI研究垂体激活和激素分泌

• 发表时间: 2012
• 作者: Yoshinaga S;Sato T;Hirakane M;Esaki K;Hamaguchi T;Haga-Yamanaka S;Tsunoda M;Kimoto H;Shimada I;Touhara K;Terasawa H;平金 真;平金 真
• 通讯作者: 平金 真

MRIを用いた嗅覚刺激による嗅球の活性化の研究

使用 MRI 嗅觉刺激激活嗅球的研究

• 发表时间: 2013
• 作者: Yoshinaga S;Sato T;Hirakane M;Esaki K;Hamaguchi T;Haga-Yamanaka S;Tsunoda M;Kimoto H;Shimada I;Touhara K;Terasawa H;平金 真
• 通讯作者: 平金 真

マンガン造影MRIによる脳下垂体の活性化とホルモン分泌の解析

使用锰增强 MRI 分析垂体激活和激素分泌

• 发表时间: 2012
• 作者: Yoshinaga S;Sato T;Hirakane M;Esaki K;Hamaguchi T;Haga-Yamanaka S;Tsunoda M;Kimoto H;Shimada I;Touhara K;Terasawa H;平金 真;平金 真;平金 真
• 通讯作者: 平金 真