Genetische und biochemische Analyse des Kinetochors der Bäckerhefe Saccharomyas cerevisiae

Die zuverläsophentrennung der Chromosomen während der Mitose ist entscheidend für die Vererbung des genetischen Materials.在将Schwesterchromatiden glyichmäßig zwischen Mutter- und Tochterzelle vertetilen zu können复制后，将对线粒体微管进行生理性结合，并对染色体进行特异性Abschnitten。这种由DNA中心体和相关蛋白质组成的连接结构，将成为动圈。Fehler bei der Trennung der Chromosomen können fatale Ausculturekungen für die Zelle haben und sich in Krebs or der Geburtsfehlern manifestieren.啤酒酵母是一种典型的微生物，可以分析其动粒功能。本课题主要包括以下三个方面：1）通过构建人工激动剂，在体内分析微管结合Dam 1复合物和其他激动剂-蛋白质的功能。2)Dam 1复合物对微管聚合和动力学的影响在体外进行了研究。3)DANDETANDEM-Affinitätsreinigung sollen weitere Kinetochor-Subkomplex isoliert und Protein-Assoziationen innerhalb des Kinetochors analysiert韦尔登.该实验将详细研究染色单体分离的分子机理。

Die zuverlässige Trennung der Chromosomen während der Mitose ist entscheidend für die Vererbung des genetischen Materials. Um die replizierten Schwesterchromatiden gleichmäßig zwischen Mutter- und Tochterzelle verteilen zu können, wird eine physikalische Verbindung zwischen dem Mikrotubuli der Mitosespindel und spezialisiserten Abschnitten der Chromosomen hergestellt. Diese Verbindungsstruktur, bestehend aus Centromer-DNA und assoziierten Proteinen, wird als Kinetochor bezeichnet. Fehler bei der Trennung der Chromosomen können fatale Auswirkungen für die Zelle haben und sich in Krebs oder Geburtsfehlern manifestieren. Die Bäckerhefe Saccharomyces cerevisiae hat sich als ausgezeichneter Modellorganismus erwiesen, um die Funktion des Kinetochors zu analysieren. Mit dem vorliegenden Projekt werden drei Ziele verfolgt: 1) Die Funktion des Mikrotubuli-bindenden Dam1-Komplexes und weiterer Kinetochor-Proteine soll durch Konstruktion eines artifiziellen Kinetochors in vivo analysiert werden. 2) Der Einfluss des Dam1-Komplexes auf Mikrotubuli-Polymerisation und -Dynamik soll in vitro untersucht werden. 3) Durch Tandem-Affinitätsreinigung sollen weitere Kinetochor-Subkomplexe isoliert und Protein-Assoziationen innerhalb des Kinetochors analysiert werden. Diese Experimente können einen wichtigen Beitrag zum detaillierten Verständnis des molekularen Mechanismus der Chromosomen-Segregation leisten.